Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适用于流式细胞仪
| Ex (nm) | 542 | Em (nm) | 580 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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适用范围
用于活细胞周期检测
产品介绍
细胞周期包含四个连续的阶段：G0/G1期、S期、G2期和M期。细胞在经历细胞周期时，在S期（合成）完成DNA复制，并在 M 期（分裂期）平均分配到两个子细胞中。这两个阶段由两个间隙期（G0/G1 期和 G2 期）分隔。两个间隙期为细胞提供了生长时间，使细胞内蛋白质和细胞器的数量翻倍。细胞还会利用这两个时期监测内部和外部环境条件，而后再进入细胞周期的下一个阶段。
Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒采用Nuclear Red™ CCS2荧光染料，可监测活细胞的周期进程与增殖情况。通过流式细胞术（PE-Texas Red通道）可测定样本中处于G0/G1期、S期、G2/M期以及凋亡前亚G1期细胞的比例。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 610/20 nm |
| 通道: | PE-Texas Red 通道 |
样品实验方案
简要概述
1.调整细胞密度至5×10⁵-1×10⁶个/mL
2.将1 µL 500X Nuclear Red CCS2添加到0.5 mL细胞溶液中
2.在37°C，5％CO2下孵育10-30分钟
3.使用流式细胞仪PE-Texas Red通道（Ex / Em = 488 nm / 615 nm）分析细胞
实验步骤
1.对于每个样品，以0.5×105至1×106细胞/ mL的密度在0.5 mL温暖的培养基或自备缓冲液中制备细胞。
注意：应单独评估每个细胞系，以确定细胞密度。
2.用测试化合物处理细胞一段时间，以诱导细胞凋亡，细胞周期停滞或其他细胞周期功能。
3.在含有生长培养基的细胞中加入1 µL 500X Nuclear Red CCS2（组分A）。
4.将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育10至30分钟。
注意：贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用Nuclear Red CCS2孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。染色前无需固定细胞，因为Nuclear Red CCS2具有细胞渗透性。
5.可选：将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟，将细胞重悬于0.5 mL的测定缓冲液（组分B）或自备的缓冲液中。
6.使用流式细胞仪PE-Texas Red通道（Ex / Em = 488/615 nm）检测荧光强度。
