活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.操作简便：提供了一种灵敏的、一步式荧光检测方法，只需简单的孵育步骤（如一小时孵育）即可完成检测，
2.高灵敏度和特异性：采用独特的超氧化物指示剂（如 MitoROS™ 580），能够快速且选择性地靶向线粒体中的超氧化物
适用范围
用于标记活细胞
产品介绍
线粒体是细胞内超氧化物的主要产生部位。低至中等水平超氧化物的产生，对于正确调控许多重要的细胞过程至关重要，这些过程包括基因表达、信号转导以及肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物生成会引发细胞氧化损伤，进而导致多种疾病的发病机制，这些疾病涵盖癌症、心血管疾病、神经退行性疾病以及衰老等。因此，检测细胞内线粒体超氧化物对于理解细胞内适当的氧化还原调控，以及这种调控失常对各种病理状况的影响来说，具有极其重要的意义。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 575/26 nm |
| 通道: | PE 通道 |
样品实验方案
简要概述
1.准备细胞密度为0.5-1×10 6 细胞 / mL
2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
3.将1 µL 500X MitoROS 580加到0.5 mL细胞悬液中
4.将细胞在37°C染色1小时
5.使用流式细胞仪通过FL2通道监测荧光强度
溶液配制
储备溶液配制
MitoROS 580储备溶液（500X）
将100 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）小瓶中，并充分混合制成500X MitoROS 580储备溶液。避光保存。
注意：请密闭存放。
关于细胞样品制备的指南，请访问https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
实验步骤
1.对于每个样品，在自备的0.5 mL生长培养基或缓冲液中制备细胞，密度为5×10 5至1×10 6个细胞/ mL。
注意：应单独评估每种细胞系，以确定超氧化物诱导的细胞密度。
2.在分析缓冲液（组分B）或自备的缓冲液（例如PBS）中用25 µL 20X测试化合物处理细胞以诱导超氧化物。对于对照细胞（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。
3.将细胞在37°C孵育至少30分钟。
注意：将 Jurkat细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟以诱导超氧化物。
4.将0.5 µL细胞悬浮液中加入1 µL 500X MitoROS 580储备液。
5.在37°C下孵育1小时。
注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻吹打细胞以保持细胞完整，并在MitoROS 580孵育之前用含血清的培养基清洗细胞一次。适当的孵育时间取决于单个细胞的类型和测试使用的化合物。
6.使用流式细胞仪FL2通道（Ex / Em = 488/590 nm）检测荧光强度。
