活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
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产品优势
1.操作简便：提供了一种灵敏的、一步式荧光检测方法，只需简单的孵育步骤（如一小时孵育）即可完成检测，
2.高灵敏度和特异性：采用独特的超氧化物指示剂（如 MitoROS™ 580），能够快速且选择性地靶向线粒体中的超氧化物
适用范围
用于标记活细胞
产品介绍
线粒体是细胞内超氧化物的主要生成源。低至中等水平超氧化物的产生对于许多关键细胞过程的正常调控至关重要，包括基因表达、信号转导以及肌肉对耐力运动训练的适应性反应。然而，线粒体超氧化物若失控性过量产生，则会引发细胞氧化损伤，进而参与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病及衰老等多种病理过程的发生发展。因此，检测细胞内线粒体超氧化物水平对于理解细胞氧化还原调控机制及其失调在各类疾病中的作用具有核心意义。
Cell Meter™荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒采用我们独创的超氧化物指示剂来定量活细胞中超氧化物水平。其核心成分MitoROS™ 580具有活细胞膜通透性，可快速特异性靶向线粒体内的超氧化物，与超氧化物反应后发出红色荧光。该试剂盒提供灵敏的一步法荧光检测方案，仅需一小时孵育即可实现活细胞线粒体超氧化物的检测，适用于荧光酶标仪和荧光显微镜等多种应用场景。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 540 nm |
| Em： | 590 nm |
| Cutoff： | 570 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底部读取 |
样品实验方案
简要概述
1.在生长培养基中准备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
3.添加MitoROS 580工作溶液
4.在37°C下将细胞染色30-60分钟
5.检测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处的荧光增加（底部读取模式）或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜
溶液配制
储备溶液配制
MitoROS 580储备溶液（500X）：
将50 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）的小瓶中，并充分混合制成500X MitoROS 580储备液，避光。
注意：25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。 为了存放，请将管子密封。
工作溶液配制
将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合制成MitoROS 580工作溶液。
注意：此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。
实验步骤
1.在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加等量的化合物缓冲液。
2.为了诱导超氧化物，将细胞板在37°C下孵育所需的时间，避光。
注意：我们在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理HeLa细胞30分钟，以诱导超氧化物。
3.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。
4.将细胞在37°C下孵育30至60分钟。
5.使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/590 nm（Cutoff = 570 m））检测荧光强度，或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。
试剂应用文献
Authors: Guan, Bingjie and Liu, Youdong and Xie, Bowen and Zhao, Senlin and Yalikun, Abudushalamu and Chen, Weiwei and Zhou, Menghua and Gu, Qi and Yan, Dongwang
Journal: Nature Communications (2024): 1--18
Authors: Li, Jing and Qi, Fangzheng and Su, Huishan and Zhang, Chuanshan and Zhang, Qing and Chen, Ying and Chen, Ping and Su, Linjia and Chen, Yanan and Yang, Yuqi and others,
Journal: International journal of biological sciences (2022): 2914
