Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 *红色荧光*

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产品优势

pH 激活荧光检测：采用 Protonex™ Red 600 乳胶珠，仅在吞噬体内酸化时发出荧光

双色检测方案：包含绿色荧光染料，可同时分析活细胞和吞噬功能

应用范围广泛：适合研究先天免疫反应、药物筛选和基于细胞的功能测定

同类替代产品：提供一种双色荧光替代方案，可替代 BioLegend 的吞噬作用检测试剂盒

适用范围

检测活细胞的吞噬活性

产品介绍

Cell Meter™荧光法吞噬作用检测试剂盒（红色荧光）采用pH激活荧光检测原理，可在活细胞中定量检测吞噬活性。它采用 Protonex™ Red 600 乳胶珠偶联物，该偶联物在中性 pH 下不发荧光，当被吞噬进入酸性吞噬体或吞噬溶酶体后即发出明亮红色荧光。这一特性避免了传统台盼蓝淬灭步骤，可同步实现颗粒内化与吞噬体成熟的精准监测。

Cell Meter™荧光法吞噬作用检测试剂盒（红色荧光）也提供了绿色荧光活细胞染料，可用于双色同步分析细胞活性与吞噬功能，兼容荧光显微镜、流式细胞仪和酶标仪平台，为先天免疫研究、细胞功能评估及药物对吞噬作用的影响分析提供高通量解决方案。

实验概览

操作流程摘要

1.细胞铺板

2.每孔加入12.5 µL Protonex™ Red 600-乳胶微球偶联物溶液

3.37°C孵育4小时

4.每孔加入12.5 µL CytoTrace™ Green

5.37°C孵育30分钟

6.使用Texas Red和FITC滤光片进行荧光显微镜检测

重要提示
实验前需将所有组分室温解冻

细胞制备指南

详细步骤请访问：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

贴壁细胞处理

96孔板每孔接种20,000-50,000个细胞（100 µL完全培养基），过夜培养

注：本实验所用RAW 264.7细胞推荐每孔50,000个细胞（100 µL培养基），需根据细胞系优化密度

储备溶液配制

除非另有说明，所有未使用的储备液需分装为单次用量，-20°C保存，避免反复冻融

Protonex™ Red 600-乳胶微球微球溶液（12X）

将8 µL微球偶联物（组分A）加入2 mL含10% FBS的培养基，并充分混匀

注：未用完微球可4°C保存

CytoTrace™ Green储备溶液（400X）

向组分B瓶中加入20 µL DMSO（组分C），并充分混匀

注：未用完的CytoTrace™ Green储备溶液需避光分装，-20°C保存

工作溶液配制

CytoTrace™ Green工作液（12X）

取5 µL 400X母液加入2 mL培养基，充分混匀

样品实验方案

1.每孔加入25 µL 6X细胞松弛素D（未提供）作为阳性对照或待测化合物，孔中的终浓度应为10 µM

注：6X细胞松弛素D配制方法——18 µL 10 mM细胞松弛素D（未提供）加入3 mL培养基中，并充分混合，需根据细胞系优化浓度*

2.细胞培养箱孵育30分钟

3.每孔加入12.5 µL 的12X Protonex™ Red 600-Latex Bead Conjugate溶液

4.将培养皿在细胞培养箱中培养4小时

注意：每个细胞系的用户应优化孵育时间。

5.每孔加入12.5 µL 12X CytoTrace™ Green工作液

6.将培养皿在细胞培养箱中培养30分钟

7.用1X PBS洗涤两次

8.使用 Texas Red 滤光片 (Ex/Em = 570/600 nm) 和带有 FITC 滤光片 (Ex/Em = 490/525 nm) 的 CytoTrace™ Green 观察细胞内的吞噬作用。

试剂应用文献