Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测
| Ex (nm) | 505 | Em (nm) | 524 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.对细胞内GSH的特异性检测
2.可与7-AAD、碘化丙啶等其他试剂联用，实现细胞活力和凋亡的多参数研究
适用范围
用于细胞内GSH检测
产品介绍
Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞活性的工具集。细胞活性可通过多种参数进行监测，本试剂盒专门通过检测细胞内抗氧化剂还原型谷胱甘肽（GSH）的耗竭来监测细胞凋亡。GSH参与多种细胞过程，包括自由基清除、药物解毒、细胞信号传导和细胞增殖。在许多细胞类型中，GSH浓度的下降是细胞响应不同凋亡刺激而走向死亡的重要早期标志。
Cell Meter™细胞内GSH检测试剂盒提供了所有必需组分及优化方案，可精准检测伴随GSH水平下降的细胞凋亡现象。该荧光检测法采用我们专利的非荧光Thiolite™ Green染料，该染料与硫醇反应后会发出强荧光，从而实现对细胞内GSH的特异性检测。在正常细胞中，Thiolite™ Green主要聚集在细胞质中；而在凋亡细胞中，该染料会部分转移至线粒体，同时染色强度减弱。经Thiolite™ Green染色的细胞可通过流式细胞术进行分析。
Cell Meter™细胞内GSH检测试剂盒可与7-AAD（货号17501）、碘化丙啶（货号17517）等其他试剂联用，实现细胞活力和凋亡的多参数研究。经优化设计，该试剂盒特别适用于通过流式细胞术筛选凋亡激活剂和抑制剂。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC 通道 |
样品实验方案
简要概述
1.用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
2.将5 µL 200X Thiolite Green加入1 mL细胞溶液中
3.将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育15至30分钟
4沉淀细胞并将细胞重悬于1 mL生长培养基中
5.使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞
溶液配制
储存溶液配制
1. Thiolite 绿色原液（200X）：将500µL DMSO（组分C）加入小瓶Thiolite Green（组分A）中并充分混合，制成200X Thiolite Green储备液，避光。
实验步骤
1.对于每个样品，在1 mL温热培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。
注意：应单独评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的细胞密度。
2.用测试化合物处理细胞所需的时间以诱导凋亡。
3.向处理过的细胞中加入5µL 200X Thiolite Green储备溶液。
4.将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育15至30分钟。
注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与Thiolite Green染料上样溶液孵育之前，用含血清的培养基清洗细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
5.可选：将细胞以1000 rpm离心4分钟，然后将细胞重悬于1 mL的测定缓冲液（组分B）或自备缓冲液中。
6.使用带有FL1通道的流式细胞仪（Ex / Em = 490/525 nm）检测荧光强度。
