Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合微孔板检测

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产品优势  

1.水溶性好：比JC-1染料水溶性显著提升

2.简便的操作流程：无需复杂仪器，普通酶标仪即可完成检测

3.性能表现好： 信号稳定性强，灵敏度高，背景干扰低，数据可靠性高

适用范围

用于标记活细胞

产品介绍

尽管JC-1被众多实验室广泛使用，但其较差的水溶性限制了部分实验应用。即使在1µM的低浓度下，JC-1在水性缓冲液中仍易产生沉淀。为此，JC-10作为JC-1的升级替代品，特别适用于需要高染料浓度的实验场景。与JC-1相比，我们的JC-10具有显著改善的水溶性特性。

JC-10能够选择性进入线粒体，并随膜电位升高发生可逆的颜色变化——从绿色变为橙红色。这一特性源于膜电位极化导致的JC-10可逆聚集：在490nm激发光下，当线粒体膜极化程度提高时，染料的发射光会从520nm（单体形式）向570nm（J-聚集体）迁移，呈现从绿色到黄橙色的可逆变色现象。

本Cell Meter™ JC-10线粒体膜电位检测试剂盒的创新之处在于：不同于其他需要流式细胞仪的JC-1试剂盒，仅需普通酶标仪即可完成线粒体膜电位变化的检测。该试剂盒为监测线粒体膜电位变化提供了最可靠的方法，特别适合大规模化合物库的高通量筛选

96孔板样品分析

概述

准备细胞

添加测试化合物

添加JC-10染料工作液（96孔板：每孔50μL 或 384孔板：每孔12.5μL ）

在37℃，5％CO2培养箱中孵育30至60分钟

添加测定缓冲液B（96孔板：每孔50μL  或384孔板：每孔12.5μL ）

在Ex / Em = 490/525和540/590 nm处监测荧光强度

注意：实验前需将所有试剂盒组分室温解冻

工作液配制

取50 µL 100× JC-10（组分A） 加入5 mL 检测缓冲液A（组分B） 中，充分混匀，配制成JC-10染料工作液。避光保存。

细胞样本制备指南请参考：https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

操作步骤

1.细胞处理时，将10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）加入所需缓冲液（如PBS或HHBS）中。

注意：添加化合物前通常无需洗涤细胞，但若待测化合物对血清敏感，可先吸除含血清培养基，随后向孔中加入等体积HHBS缓冲液（96孔板加90 µL，384孔板加20 µL），也可直接使用无血清培养基培养细胞。

2.将细胞培养板置于室温或37℃、5% CO₂培养箱中孵育至少15分钟或所需时间（例如Jurkat细胞使用喜树碱处理需4-6小时，星形孢菌素处理需3-5小时）以诱导细胞凋亡。

3.向细胞培养板每孔加入JC-10染料工作液，96孔板每孔加50 µL，384孔板每孔加12.5 µL。。

4.将培养板置于37℃、5% CO₂培养箱中避光孵育30-60分钟。

注意：具体孵育时间需根据所用细胞类型及浓度进行调整，建议针对每次实验进行优化。

5.在检测荧光强度前，向JC-10染料工作液板每孔加入检测缓冲液B（组分C）：96孔板每孔50 µL，384孔板每孔12.5 µL。

注意事项：1) 加样后切勿洗涤细胞；

                 2) 对于悬浮细胞，建议在加入检测缓冲液B（组分C）后，以800转/分钟离心2分钟（关闭离心机刹车功能）。

6.使用荧光酶标仪（底部读数模式）分别在激发/发射波长490/525 nm（截止值515 nm）和540/590 nm（截止值570 nm）条件下检测荧光强度，以进行比率分析。

试剂应用文献