Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测

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产品优势  

1.高特异性：依赖于线粒体膜电位（ΔΨm）选择性积聚在活性线粒体中

2.细胞兼容性：适用于增殖细胞、非增殖细胞，兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。

3.稳定性好：抗光漂白能力强，适合长时间活细胞成像

4.高信噪比：和其他染料相比，信噪比更高，成像更清晰

适用范围

用于标记活细胞

产品介绍

Cell Meter™ 橙色线粒体膜电位检测试剂盒是专为通过监测线粒体膜电位（MMP）丧失来检测细胞凋亡而设计的检测工具。当线粒体膜电位崩溃时，会引发线粒体通透性转换孔开放，导致细胞色素C释放至胞质，从而激活下游凋亡级联反应。

本试剂盒采用专利阳离子染料MitoLite™ Orange，在正常细胞中可积聚于线粒体并呈现红色荧光增强，而在凋亡细胞中随着MMP崩溃荧光强度显著减弱。该检测兼容流式细胞术（488 nm激发，FL2通道检测红色荧光），并可与其他试剂（如Cell Meter™磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 cat#22835）联用，实现细胞活力与凋亡的多参数分析。本试剂盒提供优化的检测方案和全部必需组分，特别适用于通过流式细胞术高通量筛选凋亡激活剂或抑制剂。

样品实验方案

简要概述

1.将待测化合物处理的细胞调整至5×10⁵~1×10⁶ cells/mL密度

2.每1 mL细胞悬液加入2 μL 500× MitoLite™ Orange母液，轻轻涡旋混匀 

3. 37℃、5% CO₂培养箱中避光孵育15-30分钟

4.离心细胞，并将细胞重悬于1 mL生长培养基中

5.使用流式细胞仪通过FL2（激发/发射 = 540/590 nm）通道分析细胞

注：本方案适用于大多数哺乳动物细胞系，具体条件需根据细胞类型优化

操作步骤

1.使用预温培养基或自选缓冲液将细胞重悬至5×10⁵~1×10⁶ cells/mL。

注：最佳密度需根据细胞系单独优化

2.加入待测化合物诱导细胞凋亡，并建立平行对照实验。

阴性对照：仅加入化合物溶剂

阳性对照：将细胞置于 37 °C、5% CO2 培养箱中，用 5-50 µM FCCP 或 CCCP 处理 15 至 30 分钟。

注意：CCCP 或 FCCP 可与 MitoLite™ Orange 同时添加。建议通过预实验确定各细胞系合适的浓度

3.将 2 μL 500× MitoLite™ Orange（组分 A）添加到处理过的细胞中。

4.将细胞置于 37 °C、5% CO2 培养箱中孵育 15 至 30 分钟。

注意：对于贴壁细胞，用 0.5 mM EDTA 轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与 MitoLite™ Orange 染料上样溶液孵育前，用含血清的培养基清洗一次。

5. 1000 rpm离心4分钟，使用1 mL Assay Buffer（组分B）或自选缓冲液重悬细胞。

6.使用流式细胞仪通过FL2通道（激发/发射 = 540/590 nm）分析细胞。