Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合微孔板检测
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.高特异性：依赖于线粒体膜电位（ΔΨm）选择性积聚在活性线粒体中
2.细胞兼容性：适用于增殖细胞、非增殖细胞，兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。
3.稳定性好：抗光漂白能力强，适合长时间活细胞成像
4.高信噪比：和其他染料相比，信噪比更高，成像更清晰
适用范围
用于标记活细胞
产品介绍
Cell Meter™ 橙色线粒体膜电位检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的试剂盒，本试剂盒通过检测线粒体膜电位（ΔΨm）的丧失来特异性监测细胞凋亡过程。当线粒体膜电位崩溃时，会引发线粒体通透性转换孔（mPTP）开放，导致细胞色素C释放至胞质，进而激活下游凋亡级联反应。
该试剂盒采用专利阳离子染料MitoLite Orange™，在正常细胞中特异性富集于线粒体（强荧光信号），而在凋亡细胞中因膜电位丧失导致荧光强度显著降低。本试剂盒提供优化的检测方案和全部必需组分，支持96孔板和384孔板的高通量筛选，适用于凋亡激活剂和抑制剂的快速筛选。
适用仪器
荧光酶标仪 |
|
| Ex: | 540 nm |
| Em： | 590 nm |
| Cutoff： | 570 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式： | 底读模式 |
样品实验方案
简要概述
1.准备细胞
2.加入待测化合物
3. 加入MitoTell™ Orange工作液：96孔板：100 µL/孔； 384孔板：25 µL/孔；
4. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育15 - 30分钟
5. 加入Assay Buffer B： 96孔板：50 µL/孔； 384孔板：12.5 µL/孔；
6.用荧光酶标仪检测（底读模式）： 激发/发射波长：540/590 nm； 截止波长：570 nm
（实验前需将所有试剂组分于室温解冻，确保完全溶解并混匀后再使用。）
工作液配制方法
将50 µL 200× MitoTell™ Orange（组分A）加入10 mL Assay Buffer A（组分B）中，充分混匀后即配制成MitoTell™ Orange工作液，需避光保存。
细胞样本制备指南：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
实验步骤
1.使用待测化合物处理细胞至预定时间以诱导凋亡，并同步设立平行对照实验
阴性对照：仅用载体处理细胞。
阳性对照：在37°C 5％CO2培养箱中，以5-50 µM的浓度用FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。
注意：CCCP或FCCP可以与MitoTell Orange同时添加。 为了获得结果，可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。
2.移除细胞培养基。
注意：在添加MitoTell Orange工作溶液之前，必须除去细胞培养基。
3..向96孔板每孔加入100 µL MitoTell™ Orange工作液（384孔板每孔25 µL）。
4.将培养板在5%的CO2、37°C的培养箱中避光孵育15-30分钟
注：具体孵育时间需根据细胞类型及浓度优化，建议实验前进行条件摸索
5.向96孔板每孔加入50 µL Assay Buffer B（组分C）（384孔板12.5 µL/孔）。
注：加样后切勿洗涤细胞；悬浮细胞需在加入缓冲液后以800 rpm离心2分钟，然后制动。
6.在加入Assay Buffer B（组分C）后10-30分钟内，使用荧光酶标仪（底读模式，激发/发射=540/590 nm，截止波长570 nm）监测荧光强度，可以使用终点模式，也可以使用动力学模式。
