Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
通过荧光显微镜同步检测凋亡细胞、坏死细胞、健康细胞
适用范围
用于细胞凋亡和细胞坏死检测
产品介绍
Cell Meter™细胞检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的工具，可通过多种参数进行检测。本试剂盒专为同步监测细胞凋亡、坏死及健康细胞状态而设计。
细胞凋亡是一种主动的、程序化的细胞自主解体过程，其特点是不引发炎症反应。在凋亡过程中，磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）会外翻至细胞膜外侧。作为细胞凋亡早期/中期阶段的通用标志物，PS的膜外暴露甚至可早于细胞形态学变化被检测到。Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒采用的PS探针在与膜表面PS结合后会发出红色荧光。
细胞坏死则是一种被动的、由环境扰动导致的意外性细胞死亡，伴随炎症性细胞内容物的失控释放。通过膜不通透性染料Nuclear Blue DCS1（Ex / Em = 350/461 nm）对细胞核的标记，可直观反映细胞膜完整性的丧失——这一特征标志着晚期凋亡与坏死状态
Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒还提供活细胞胞质标记染料Cellbrite Red（Ex / Em = 613/631 nm），用于标记存活细胞的细胞质。经优化设计，该试剂盒可通过流式细胞仪或荧光显微镜同步检测：
凋亡细胞（绿色）
坏死细胞（蓝色和/或绿色）
健康细胞（红色）
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | 494 nm（细胞凋亡）/350 nm（坏死）/613 nm（活） |
| Em： | 520 nm（细胞凋亡）/461 nm（坏死）/631 nm（活） |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 滤波片: | FITC滤波片 (凋亡) / DAPI滤波片(坏死) / Cy5滤波片 (活) |
实验方案概览
操作流程摘要
1.制备含测试化合物的细胞样本
2.加入三色荧光工作液（100 µL/样本）
3.室温或37°C孵育30-60分钟
4.使用荧光显微镜分析：
凋亡细胞：FITC通道
坏死细胞：DAPI通道
健康细胞：Texas Red/Cy5通道
重要注意事项
我们使用星形孢菌素（SS）在37°C处理HeLa细胞4小时诱导凋亡
实验前需将所有组分恢复至室温
工作液配制方法
取1 mL Assay Buffer（组分B），依次加入：10 µL 100X Annexin V-iFluor™ 488标记物（组分A）、5 µL 200X Nuclear Blue™ DCS1（组分C）、5 µL 200X Cellbrite™ Red（组分D）配制的三色荧光检测液在室温下至少稳定1小时。
注：不同细胞类型的最佳染色条件可能有所差异，建议单独优化各组分浓度。
细胞样本制备指南详见：https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
标准实验流程
1.移除含测试化合物的细胞培养基
2. 96孔板：每孔加入100 µL三色荧光检测液；384孔板：每孔加入50 µL三色荧光检测液，37°C避光孵育30-60分钟
3.使用HBSS、PBS或自选缓冲液洗涤细胞两次
4.荧光检测
凋亡细胞： FITC滤光片（Ex/Em = 494/520 nm）下观察膜表面绿色荧光（Annexin V-iFluor™ 488与PS结合）
坏死细胞：DAPI滤光片（Ex/Em = 350/461 nm）检测
健康细胞：Texas Red/Cy5滤光片（Ex/Em = 613/631 nm）检测
