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Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测

英文名称:Cell Meter™ NIR Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit *Optimized for Flow Cytometry*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势  

1.高特异性:依赖于线粒体膜电位(ΔΨm)选择性积聚在活性线粒体中

2.细胞兼容性:适用于增殖细胞、非增殖细胞,兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。

3.稳定性好:抗光漂白能力强,适合长时间活细胞成像

4.高信噪比:和其他染料相比,信噪比更高,成像更清晰

 

适用范围

用于标记活细胞

 

产品介绍

Cell Meter™ 近红外膜电位检测试剂盒是一套通过监测线粒体膜电位(ΔΨm)变化来检测细胞凋亡的专业试剂盒。当细胞凋亡发生时,线粒体膜电位崩溃会引发通透性转换孔(mPTP)开放,导致细胞色素C释放至胞质,进而激活下游凋亡级联反应。

本试剂盒采用专利阳离子染料MitoLite NIR™,在正常细胞中可特异性积聚于线粒体(强荧光信号),而在凋亡细胞中因膜电位丧失导致荧光强度显著降低。该检测兼容流式细胞术(FL4通道)和荧光显微成像,并可与其他试剂联用(如碘化丙啶和Cell Meter™磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒),实现细胞活力与凋亡的多参数分析。经优化后适用于通过流式细胞术高通量筛选凋亡激活剂或抑制剂。

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 640 nm
Em: 660/20 nm
通道: APC 通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.将待测化合物处理的细胞调整至5×10⁵~1×10⁶ cells/mL密度

2.每1 mL细胞悬液加入5 μL 200× MitoLite™ NIR母液,轻轻涡旋混匀 

3. 37℃、5% CO₂培养箱中避光孵育15-30分钟

4.离心细胞,并将细胞重悬于1 mL生长培养基中

5.使用流式细胞仪通过FL4通道(激发635nm,发射670nm)分析细胞

注:本方案适用于大多数哺乳动物细胞系,具体条件需根据细胞类型优化

 

操作步骤

1.使用预温培养基或自选缓冲液将细胞重悬至5×10⁵~1×10⁶ cells/mL。

注:最佳密度需根据细胞系单独优化

2.加入待测化合物诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。

阴性对照:仅加入化合物溶剂

阳性对照:将细胞置于 37 °C、5% CO2 培养箱中,用 5-50 µM FCCP 或 CCCP 处理 15 至 30 分钟。

注意:CCCP 或 FCCP 可与 MitoLite™ NIR 同时添加。建议通过预实验确定各细胞系合适的浓度

3.将 5 µL 200X MitoLite™ NIR(组分 A)添加到处理过的细胞中。

4.将细胞置于 37 °C、5% CO2 培养箱中孵育 15 至 30 分钟。

注意:对于贴壁细胞,用 0.5 mM EDTA 轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与 MitoLite™ NIR 染料上样溶液孵育前,用含血清的培养基清洗一次。

5. 1000 rpm离心4分钟,使用1 mL Assay Buffer(组分B)或自选缓冲液重悬细胞。

6.使用流式细胞仪通过FL4通道(激发635nm,发射670nm)分析细胞。