Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
通过结合外翻的PS，特异性监测细胞凋亡过程。
适用范围
用于细胞凋亡检测
产品介绍
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的专业工具。细胞活力可通过多种参数进行评估，本试剂盒通过检测磷脂酰丝氨酸（PS）外翻现象特异性监测细胞凋亡过程。在凋亡发生时，PS会从细胞膜内侧转移至外侧，其细胞表面暴露可作为凋亡早期/中期的普适性标志物，且该检测信号早于细胞形态学变化出现。
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒采用专利小分子Apopxin™ PS探针，该探针与膜PS结合后可产生蓝色荧光，其光谱特性与Pacific Blue®相似（注：Pacific Blue®为Invitrogen公司注册商标）。该蓝色荧光染料可被405 nm紫激光有效激发，并在~450 nm处发射强蓝色荧光。
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒专为配备Violet Laser的流式细胞仪优化，特别适用于细胞的多色流式分析，可与荧光标记抗体联用，实现多色流式细胞术检测应用。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 405 nm |
| Em： | 450/40 nm |
| 通道: | Pacific Blue 通道 |
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荧光显微镜 |
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| Ex: | Violet 滤波片组 |
| Em： | Violet 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本（200 µL/样本）
2.加入Apopxin Violet 450检测溶液
3.室温避光孵育30-60分钟
4.使用配备450/40 nm滤光片（Pacific Blue通道）的流式细胞仪或 Violet滤光片的荧光显微镜分析细胞。
重要提示：实验前需将100X碘化丙啶（组分C）于室温解冻。
实验操作流程
1.使用测试化合物处理细胞（如：Jurkat细胞用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。
注意：贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构，常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen和van Engelend等已建立相关方法
2.离心收集细胞，得到1-5×105个细胞/管。
3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。
4.将2μLApopxin Violet 450（组分A）加入细胞中。
（可选步骤）加入2 µL 100X碘化丙啶（组分C）标记坏死细胞。
5.室温避光孵育30至60分钟。
可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。
6.使用配备450/40 nm滤光片（Pacific Blue通道）的流式细胞仪或 Violet滤光片的荧光显微镜分析细胞。
流式细胞仪分析方案
凋亡检测
使用450/40 nm滤光片（Pacific Blue通道）定量Apopxin™ Violet 450结合情况
细胞活力检测
添加碘化丙啶后通过610/20 nm滤光片（PE-Texas Red通道）分析
注：贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构，常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen等学者已建立相关方法
荧光显微镜分析方案
1.吸取孵育后的细胞悬液，用检测缓冲液洗涤1-2次，随后用检测缓冲液重新悬浮细胞。
2.将细胞悬液加至带有盖玻片的载玻片上。
*注：对于贴壁细胞，建议直接在盖玻片上培养。完成Apopxin™ Violet 450孵育后，用检测缓冲液洗涤1-2次，重新加入检测缓冲液覆盖盖玻片，倒置后观察。也可选择用2%甲醛固定细胞后镜检。*
3.使用紫光滤光片（Violet filter）观察Apopxin™ Violet 450标记的凋亡细胞。
当加入碘化丙啶时，通过TRITC滤光片检测细胞活性。细胞膜表面的蓝色荧光表明Apopxin™ Violet 450与细胞表面PS的结合。
