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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 深红色荧光,适合微孔板检测

英文名称:Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Deep Red Fluorescence Optimized for Microplate Readers*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

1.通过结合外翻的PS,特异性监测细胞凋亡过程。

2.兼具微孔板、荧光显微镜和流式细胞仪多平台。

 

适用范围

用于细胞凋亡检测

 

产品介绍

Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的工具集。细胞活力监测可通过多种参数实现,本试剂盒专为通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)的膜外翻现象来监测细胞凋亡而设计。在细胞凋亡过程中,磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧转移至外侧。细胞表面出现磷脂酰丝氨酸是细胞凋亡早期/中期阶段的普遍标志,这一现象可在形态学变化出现之前被检测到。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒采用小分子荧光探针Apopxin™ PS探针。当与膜表面的PS结合后会产生红色荧光,适用于微孔板检测、显微镜观察及流式细胞术等多种平台——而目前市面上多数凋亡检测试剂盒仅能兼容显微镜或流式细胞仪中的单一平台。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 650 nm
Em: 680 nm
Cutoff: 665 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

样品实验方案

摘要

1.制备含测试化合物的细胞样本(96孔板:100 µL/孔;384孔板:25 µL/孔)

2.加入等体积的Apopxin™Deep Red工作溶液

3.在室温下孵育1小时

4.使用荧光酶标仪(底部读数模式,Ex/Em = 650/680 nm,截止波长665 nm)或配备 Cy5滤片的荧光显微镜检测荧光强度

 

工作液配制

取10 μL 100X Apopxin™Deep  Red(组分A)加入1 mL检测缓冲液(组分B),混匀配制成工作液

注:每孔需100 μL工作液,现配现用

 

细胞制备指南

详见:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

 

实验操作流程

1.96孔板每孔加入10 µL 或者384孔板每孔加入2.5 µL 10x测试化合物母液(溶于PBS或指定缓冲液),空白对照孔(无细胞培养基)加入等量缓冲液

2.将细胞板置于5% CO₂、37℃培养箱孵育(如:Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时)

*注:喜树碱等化合物在405 nm激发时可能因380-490 nm宽发射光谱导致假阳性*

3.在每个孔中添加100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Apopxin™Deep Red工作溶液。

4.室温避光下孵育细胞板≥1小时。

5.(特别针对悬浮细胞)800 rpm离心2分钟(关闭刹车功能)

6.使用荧光酶标仪(底部读数模式,Ex/Em = 650/680 nm,截止波长665 nm)或配备 Cy5滤片的荧光显微镜检测荧光强度