Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

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产品优势  

1.特异性强：利用溶酶体 pH 梯度，选择性积聚在溶酶体，实现特异性染色

2.荧光特性好：信噪比高，光稳定性强，进入溶酶体后荧光显著增强

3.细胞适用性广：适用于增殖与非增殖细胞，以及悬浮细胞和贴壁细胞

 

适用范围

主要用于标记活细胞

 

产品介绍

溶酶体是含有酸性水解酶的细胞器，能够分解代谢废物和细胞碎片，消化多余或老化的细胞器、食物颗粒以及被吞噬的病毒或细菌。溶酶体膜使其内部的消化酶在pH 4.5的酸性环境下发挥作用——相较于弱碱性的细胞质（pH 7.2），溶酶体内部呈酸性（pH 4.5-4.8）。这种pH梯度的维持依赖于溶酶体膜上的质子泵和氯离子通道，它们持续将质子从细胞质泵入溶酶体内。

Cell Navigator®荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞膜、溶酶体、线粒体、细胞核等亚细胞结构的荧光成像工具。这种对活细胞器的选择性标记技术，为在时空维度研究细胞活动提供了强大手段。本款试剂盒专为活细胞溶酶体设计，可标记出红色荧光。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒的核心成分LysoBrite™ Deep Red是我们自主研发的溶酶体示踪染料，该染料可能通过溶酶体pH梯度选择性富集于溶酶体中。这种疏水性溶酶体指示剂可轻松穿透活细胞膜，进入细胞后即被捕获在溶酶体内，并在溶酶体中产生显著增强的荧光特性。这一关键特性使其具有极低染色背景，可应用于细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力、细胞凋亡和细胞毒性等研究领域，适用于增殖与非增殖细胞，悬浮与贴壁细胞皆可兼容。

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荧光显微镜
Ex:	Texas Red 滤波片组
Em：	Texas Red  滤波片组
推荐孔板:	黑色透明底板

分析方案

概述

1. 准备细胞

2. 加入LysoBrite™ Deep Red工作液

3. 37°C孵育30分钟

4.使用荧光显微镜激发/发射 = 590/620 nm（Texas Red滤光片组）观察细胞

注意：实验前需将所有试剂盒组分室温解冻。

 

工作液配制

将10 µL 500× LysoBrite™ Deep Red原液（组分A）加入5mL活细胞染色缓冲液（组分B）中，充分混匀，配制成LysoBrite™ Deep Red工作液。避光保存。

注意：1. 10 µL 500× LysoBrite™Deep Red原液（组分A）可满足一块96孔板的使用需求。

          2. 荧光溶酶体指示剂的浓度需根据具体实验调整，染色条件可依据细胞类型及探针对细胞/组织的渗透性进行优化。

细胞样本制备指南请参考：https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

 

实验操作流程

贴壁细胞染色

1.可选择在96孔黑色壁板/透明底板中（每孔加入100 µL培养基）或于培养皿内的盖玻片上进行细胞培养（加入适量培养基）。

2.当细胞达到所需汇合度时，向每孔加入1/2体积的Lysolite™ Deep Red工作液（例如96孔板每孔加50 µL）。

3.将细胞置于37°C、5% CO2培养箱中孵育30至60分钟。

4.孵育完成后，向已加入Lysolite™ Deep Red工作液的96孔板每孔补加50 µL染色缓冲液B（组分C）

5.在室温下培养15 - 30分钟

6..使用荧光显微镜激发/发射 = 590/620 nm（Texas Red滤光片组）观察细胞。

注：LysoBrite™ Deep Red染料具有极低或无细胞毒性，适用于细胞追踪研究。若用于细胞追踪，请勿添加染色缓冲液B——直接将染料工作液更换为生长培养基后，即可进行荧光显微镜观察。

若细胞染色信号不足，建议通过提高染料工作浓度或延长孵育时间以增强染料在细胞内的累积效果。

 

悬浮细胞染色

1. 1000 rpm离心5分钟收集细胞沉淀，弃上清。

2.用预热的生长培养基（如每管100ul）轻柔重悬细胞，加入1/2体积(每管50 µL)LysoBrite™ Deep Red工作液。

3.将细胞置于37°C、5% CO2培养箱中孵育30分钟至60分钟。

4.向已加入Lysolite™ Deep Red工作液的孔板中每管补加50 µL染色缓冲液B（组分C）。

5.在室温下培养15 - 30分钟。

6.使用荧光显微镜激发/发射 = 590/620 nm（Texas Red滤光片组）观察细胞。

注：1.LysoBrite™ Deep Red染料具有极低或无细胞毒性，适用于细胞追踪研究。若用于细胞追踪，请勿添加染色缓冲液B——直接将染料工作液更换为生长培养基后，即可进行荧光显微镜观察。

      2.若细胞染色信号不足，建议通过提高染料工作浓度或延长孵育时间以增强染料在细胞内的累积效果。

      3.悬浮细胞可能附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理的盖玻片上，并按贴壁细胞进行染色。

 

试剂应用文献

Evaluation of Double Self-Immolative Linker-Based Antibody--Drug Conjugate FDA022-BB05 with Enhanced Therapeutic Potential
Authors: Zhang, Yifan and Wang, Lei and Cao, Xuemei and Song, Ruiwen and Yin, Sicheng and Cheng, Zhiyang and Li, Weinan and Shen, Keyu and Zhao, Teng and Xu, Jun and others,
Journal: Journal of Medicinal Chemistry (2024)