Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光
Ex (nm) | 501 | Em (nm) | 510 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.特异性强:利用溶酶体 pH 梯度,选择性积聚在溶酶体,实现特异性染色
2.荧光特性好:信噪比高,光稳定性强,进入溶酶体后荧光显著增强
3.细胞适用性广:适用于增殖与非增殖细胞,以及悬浮细胞和贴壁细胞
适用范围
主要用于标记活细胞
产品介绍
Cell Navigator®荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞膜、溶酶体、线粒体和细胞核等亚细胞结构的荧光成像工具。这种对活细胞器的选择性标记方法,为在时空维度研究细胞事件提供了强大手段。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒专为绿色荧光标记活细胞溶酶体而设计,采用专利的溶酶体趋向性染料。该染料可能通过溶酶体pH梯度选择性富集,其疏水特性使其能轻松穿透完整活细胞膜,并在进入细胞后被捕获于溶酶体中。染料进入溶酶体后荧光信号显著增强,这一关键特性大幅提升了其对溶酶体的选择性标记能力。
该标记方案操作简便,耗时极少,可轻松适配多种荧光检测平台,包括微孔板检测、免疫细胞化学和流式细胞术等。适用于细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力、凋亡及细胞毒性等多种研究领域。试剂盒提供所有必需组分及优化后的细胞标记方案,既适用于增殖期也适用于静止期细胞,可同时用于悬浮和贴壁细胞。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | FITC 滤波片组 |
Em: | FITC 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
分析方案
概述
1. 准备细胞
2. 加入LysoBrite™ Green工作液
3. 37°C孵育30分钟至2小时
4.使用荧光显微镜激发/发射 = 490/525 nm (FITC滤光片组) 观察细胞
注意:实验前需将所有试剂盒组分室温解冻。
工作液配制
将20 µL 500× LysoBrite™ Green原液(组分A)加入10 mL活细胞染色缓冲液(组分B)中,充分混匀,配制成LysoBrite™ Green工作液。避光保存。
注意:1. 20 µL 500× LysoBrite™ Green原液(组分A)可满足一块96孔板的使用需求。
2. 荧光溶酶体指示剂的浓度需根据具体实验调整,染色条件可依据细胞类型及探针对细胞/组织的渗透性进行优化。
细胞样本制备指南请参考:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
实验操作流程
贴壁细胞染色
1.可选择在96孔黑色壁板/透明底板中(每孔加入100 µL培养基)或于培养皿内的盖玻片上进行细胞培养(加入适量培养基)。待细胞达到所需汇合度后,加入等体积的LysoBrite™ Green工作液。
2.置于37°C、5% CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。
3.使用荧光显微镜激发/发射 = 490/525 nm (FITC滤光片组) 观察细胞。
注: 若染色效果不佳,建议提高染料浓度或延长孵育时间以促进染料积累。
悬浮细胞染色
1. 1000 rpm离心5分钟收集细胞沉淀,弃上清。
2.用预热的生长培养基轻柔重悬细胞,加入等体积LysoBrite™ Green工作液。
3.置于37°C、5% CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。
4.使用荧光显微镜激发/发射 = 490/525 nm (FITC滤光片组) 组观察细胞。
注意:1.若染色效果欠佳,建议提高染料浓度或延长孵育时间
2.悬浮细胞可通过BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理盖玻片进行贴壁后,参照贴壁细胞步骤染色。