活细胞染色 CytoTell 蓝色

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产品特点

CytoTell® Blue 是一种蓝色荧光细胞增殖染料，用于在多色流式细胞术和荧光显微镜应用中监测细胞分裂并对活细胞进行长期示踪。

降低细胞毒性：为长期活细胞增殖研究提供更低的细胞毒性

增强增殖追踪：通过荧光逐步稀释，可监测连续的细胞世代

兼容 405 nm 激光：针对基于紫激光的流式细胞仪和成像系统进行了激发优化

广泛的应用兼容性：适用于流式细胞术、荧光显微镜、细胞内染色工作流程以及多色细胞分析应用

独特光谱特征：与 GFP 和 FITC 实现光谱分离，适用于多色细胞分析应用

适用范围

用于在多色流式细胞术和荧光显微镜应用中监测细胞分裂并对活细胞进行长期示踪

产品介绍

CytoTell® Blue 是一种蓝色荧光细胞增殖指示剂，专为通过流式细胞术和荧光显微镜监测细胞分裂及长期示踪活细胞而开发。随着细胞分裂，该染料被平均分配到子细胞中，导致荧光强度逐代减半，从而能够可视化连续的细胞世代。

CytoTell® Blue 的激发峰值约在 405 nm，发射峰值约在 450 nm，因此与紫激光激发兼容，并可使用常用于 Pacific Blue® 或 BD Horizon® V450 通道的 450/20 带通滤光片进行检测。

CytoTell® Blue 专为多色应用而开发，适用于因与 GFP 或 FITC 标记抗体存在光谱重叠而无法使用 CFSE 及其他基于荧光素的增殖染料的情况。该染料表现出极低的细胞毒性，并与基于荧光素的探针实现光谱分离，适用于多参数细胞分析。使用 CytoTell® Blue 标记的细胞可经过标准含甲醛固定剂和基于皂苷的透化缓冲液进行固定和透化，以用于细胞内靶标分析，从而使该染料适用于下游细胞内染色工作流程和多色流式细胞术应用。

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物准备细胞

2.加入1X染料工作液

3.在室温或37 ^o C 下将染料与细胞共孵育10至30分钟

4.去除染料工作液

5.使用流式细胞仪和适当的过滤器进行分析

重要说明

实验开始前，将试剂盒所有组分置于室温。

注：CytoTell™染料为冻干粉末。若在 - 20°C 下避光储存且避免反复冻融，其稳定性至少可达 6 个月。

溶液配制

储备溶液配制

除非另有说明，所有未使用的储备液应分装为单次使用量，制备后保存于-20°C，避免反复冻融

CytoTell 染料储备液（500X）：

向染料粉末瓶中加入500 µL DMSO，涡旋振荡混匀制备储备液（500X）

注意：储备液需现配现用；剩余溶液应分装后于<-20°C冷冻保存。避免反复冻融并避光

工作溶液配制

CytoTell 染料工作溶液（1X）：

使用前将500X DMSO储备液按1:500比例用HHBS缓冲液（Hanks平衡盐溶液含20 mM Hepes）或自选pH 7缓冲液稀释（如：1 µL 500X储备液加入500 µL缓冲液），涡旋振荡混匀

注意：工作液终浓度需根据不同细胞类型和/或实验条件进行优化，建议测试至少跨越十倍浓度的梯度范围。例如CytoTell™ Red在某些细胞类型中的使用量可能远低于推荐浓度

实验操作流程

1.用测试化合物处理细胞所需的时间。

2.离心细胞以获得每管1-5×10 ⁵个细胞。

3.在500 µL CytoTell 染料工作溶液中重悬细胞。

可选：可不移除培养基直接向细胞中加入500X DMSO储备液（如：向500 µL细胞悬液中加入1 µL 500X储备液）

4.室温或37°C将细胞与染料溶液孵育10至30分钟，避光。

5.从细胞中除去染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中，每管可得到1-5×10 ^5个细胞。

6.用流式细胞仪或荧光显微镜在相应激发/发射波长下监测荧光变化

试剂应用文献