红色荧光示踪探针 CytoTrace CFDA

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产品优势

荧光标记可持续至少24小时，具有理想的细胞示踪特性

适用范围

用于细胞示踪

产品介绍

CytoTrace™Red荧光探针保留了Cy3/TRITC的光谱特性，可通过荧光显微镜或流式细胞仪便捷检测，可自由穿过细胞膜进入细胞内，并在细胞内转化为不可透过细胞膜的产物。该染料能在活细胞中保留多代，可传递至子代细胞，但不会扩散至相邻细胞。

CytoTrace™Red 染料的荧光标记可持续至少24小时，具有理想的细胞示踪特性。该探针的染色结果可采用甲醛或戊二醛固定，适用于信号放大及其他后续实验应用。其荧光光谱与GFP或FITC标记抗体的光谱很好地区分，因此是进行GFP细胞系或FITC标记抗体多重检测的理想选择。

操作步骤

本方案为通用指导，需根据具体实验需求调整

1.准备2-10 mM DMSO储备溶液

• 产品#22014：向50 μg试剂瓶中加入45 μL DMSO，配制成2 mM储备液（1 mg/mL≈1.8 mM）

• 产品#22015：向50 μg试剂瓶中加入36 μL DMSO，配制成2 mM储备液（1 mg/mL≈1.46 mM）

• 产品#22016：加入153 μL DMSO配制成10 mM储备液（1 mg/mL≈1.53 mM）

• 产品#22017：加入215 μL DMSO配制成10 mM储备液（1 mg/mL≈2.15 mM）

• 产品#22020：将4.2 mg试剂溶于1 mL DMSO配制成10 mM储备液（1 mg/mL≈2.4 mM）

注意：储备液需现配现用，剩余溶液应分装避光保存于<-20°C，避免反复冻融。

2.配制工作液

使用前将储备液用HHBS缓冲液（含20 mM Hepes，pH 7.0）或自选缓冲液稀释至1-20 μM，涡旋混匀。

3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞：

3.1用测试化合物处理细胞所需的时间。

3.2离心细胞，每管得到2-10 x10⁵细胞。

3.3用500 μL工作液重悬细胞（来自步骤2）。

3.4将细胞与染料溶液在室温或37° C下避光放置15至30分钟。

3.5从细胞中除去染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中，每管可得到2-10 x 10 ⁵个细胞。

3.6用流式细胞仪（FL1通道） 或荧光显微镜监测Ex / Em = 490/520 nm处的荧光变化。

细菌细胞染色：

推荐将储备液以1:800比例稀释于经测试菌预培养的营养肉汤中（新鲜肉汤或PBS也可用）。菌悬液需用PBS稀释至10⁵-10⁷个/mL，染色方法：将1 mL菌液过0.45 μm滤膜（25mm）后真空抽滤，加入1 mL染料工作液，室温避光孵育5-10分钟，即可对细菌染色。

试剂应用文献

Exploring the Functions of Mutant p53 through TP53 Knockout in HaCaT Keratinocytes
Authors: Romashin, Daniil and Rusanov, Alexander and Arzumanian, Viktoriia and Varshaver, Alexandra and Poverennaya, Ekaterina and Vakhrushev, Igor and Netrusov, Alexander and Luzgina, Nataliya
Journal: Current Issues in Molecular Biology (2024): 1451--1466