绿色荧光示踪探针 CytoTrace Ultra Green
Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | 822.72 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.是多色检测(如细胞毒性等复合实验)的理想选择
适用范围
用于细胞示踪
产品介绍
CMFDA(5-氯甲基荧光素二乙酸酯)作为经典的细胞示踪剂,在科研领域已有长期应用。现推出新一代荧光染料CytoTrace™ Ultra Green,其卓越性能可精准追踪细胞运动轨迹与定位。该染料具有优异的细胞内滞留性,能实现活细胞的多代次追踪。
在相同实验条件下,与CMFDA相比,CytoTrace™ Ultra Green具备显著优势:荧光亮度更高、光稳定性更强、使用耐受性好。其荧光信号可固定保存,经固定处理后仍保持高度稳定性,因此成为多色检测(如细胞毒性等复合实验)的理想选择。
CytoTrace™ Ultra Green的激发与发射光谱特性与FITC完全一致,并能与常见红色荧光染料(如Texas Red、Cy5、Cy7、iFluor® 647/750、Alexa Fluor® 647/750等)实现良好区分。CytoTrace™ Ultra Green可广泛应用于各类活细胞追踪研究,兼容流式细胞术与荧光显微成像技术。
实验方案摘要
细胞准备与染色流程:
1.制备含测试化合物的细胞样本
2.加入0.5-5 µM CytoTrace™ Ultra Green工作液
3.室温或37°C孵育15-30分钟
4.移除染色工作液
5.使用流式细胞仪检测(激发/发射波长490/520 nm,FITC滤光片组)
溶液配制
所有未使用的母液应分装为单次用量,-20°C避光冷冻保存,避免反复冻融
储备溶液配制
CytoTrace Ultra Green储备液(2-10 mM):
添加适量的DMSO充分混合以制成CytoTrace Ultra Green原液(2-10 mM)。
注意:储备溶液现配现用;所有剩余的溶液应等分,-20°C避光冷冻保存,避免反复冻融
工作溶液配制
CytoTrace Ultra Green工作溶液:
通过用Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或自备的pH=7的缓冲液稀释DMSO储备液,制备0.5至5 µM的染料工作液,并离心。
注意:在某些细胞类型,可能需要较低的浓度才能染色细胞。我们建议在进行实验之前针对每种细胞类型进行测试以获得佳浓度使实验更顺利。
操作步骤
1.用测试化合物处理细胞。
2.离心收集细胞(2-10×10⁵细胞/管)
3.将细胞重悬于500 µL CytoTrace Ultra Green工作溶液中。
4.在室温或37°C避光,将细胞与染料溶液孵育15至30分钟,。
5.从细胞中除去染料工作溶液;
可选:4%甲醛固定细胞。
6.用HHBS或自备的缓冲液洗涤细胞一次。
7.将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中,每管可得到2-10×10 5个细胞。
8.使用流式细胞仪或带有FITC滤波片组的荧光显微镜检测Ex / Em = 490/520 nm处的荧光变化。