磷酸二酯酶PDE IV底物 FAM-cAMP 绿色荧光

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适用范围

用于测定PDE IV活性或筛选PDE IV抑制剂

产品介绍

这种绿色荧光cAMP衍生物是磷酸二酯酶（PDE）IV的特异性底物。该底物可结合抗cAMP抗体，通过FRET检测或荧光偏振（FP）模式用于测定PDE IV活性或筛选PDE IV抑制剂。磷酸二酯酶是一类降解第二信使分子——环核苷酸cAMP和cGMP的酶家族，通过调控环核苷酸信号在亚细胞结构域中的定位、持续时间和振幅，成为这些第二信使分子介导的信号转导过程的重要调节因子。 

凭借其独特的组织分布特征及结构与功能特性，PDE酶常成为药物抑制的靶点。PDE抑制剂通过抑制cAMP或cGMP的降解，能够延长或增强由这些第二信使介导的生理过程效应。目前PDE抑制剂已被确定为肺动脉高压、冠心病、痴呆、抑郁症和精神分裂症等领域的潜在治疗新药。

适用仪器

样品实验方案 

溶液制备 

储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分a试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融。

 FAM-cAMP PDE IV储备溶液（1 mM）：

将500 µL DMSO加入0.5 umol FAM-cAMP PDE IV底物瓶中，制成1 mM储备液。

工作溶液

FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物测定溶液（2X）：

通过将1 mM FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物储备溶液稀释到您的PDE缓冲液（例如10 mM Tris-HCl）中，制成2X FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物测定溶液 ，pH 7.4、10 mM的Mg Cl2、1 mM的MnCl2）制成200-400 nM的溶液。 注意：仅进行测定所需的足够数量。

样品操作及分析

1.将等体积的PDE IV标准品或样品与2X FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

2.在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光偏振。