FDP(荧光素二磷酸酯四铵盐) CAS 217305-49-2

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产品优势

灵敏度高

适用范围

用于各类ELISA检测体系，同时也可用于酪氨酸磷酸酶的活性检测

产品介绍

无色无荧光的FDP（荧光素二磷酸酯）与磷酸酶作用后，可被水解生成具有强荧光特性的荧光素。该产物具备优异的光谱特性，与大多数配备氩激光激发的荧光仪器的最佳检测窗口完美匹配。此外，FDP也可用于比色法检测磷酸酶活性，因为其酶解产物（荧光素）具有极高的消光系数（接近100,000 cm⁻¹mol⁻¹）。部分文献认为FDP是灵敏度高的荧光磷酸酶底物之一。

FDP已广泛应用于各类ELISA检测体系，同时也可用于酪氨酸磷酸酶的活性检测。

注意事项

FDP具有热不稳定性，储存固体样品及储备液时需采取特殊防护措施。

适用仪器

磷酸盐底物的测定方案

概述

在Tris缓冲液（50μL）中制备10-50μM磷酸盐

添加磷酸酶标准品和/或测试样品（50μL）

在室温或37℃孵育30至120分钟监测荧光强度

以下是溶液中磷酸酶测定的推荐方案。 该说明仅提供指导，应根据具体需要进行修改。

储备液配制

除非另有说明，所有未使用的储备液应分装成单次使用量，于-20°C保存并避免反复冻融。

FDP储备液

用超纯水配制2-10 mM储备液。

注：储备液需现配现用

工作液制备

FDP工作液（2X）

实验当天用超纯水溶解FDP或解冻储备液分装，在100 mM Tris缓冲液（或自选缓冲液，pH 8-9，避免使用磷酸盐缓冲液）中配制10-50 µM的2X工作液。

样品实验方案

1.向磷酸酶标准品孔、空白对照孔及测试样品孔中各加入50 µL 2X FDP工作液，使每孔总体积达100 µL（384孔板每孔加25 µL样品+25 µL 2X工作液）

2.避光条件下在适宜温度孵育反应30-120分钟

3.使用荧光酶标仪在合适滤光片组下监测荧光增强

4.以仅含检测缓冲液的空白孔作为对照，从含磷酸酶反应的孔值中扣除空白值

试剂应用文献