钙离子荧光探针Fluo2 AM
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | 1060.96 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.低背景荧光：与Ca²⁺结合后会显著增强荧光信号，因此能有效降低背景干扰，提高检测灵敏度。
2.适用范围广：荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计及荧光酶标仪等设备，精确测定细胞内游离钙离子浓度的动态变化。
3.单波长检测：荧光强度随Ca²⁺浓度升高而增强.
适用范围
用于钙离子检测
产品介绍
钙离子检测在众多生物学研究中至关重要。基于荧光探针的钙离子检测技术，能够通过与钙离子结合产生特征性光谱响应，帮助研究人员借助荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计及荧光酶标仪等设备，精确测定细胞内游离钙离子浓度的动态变化。
Fluo-2作为Fluo-3与Fluo-4的前体化合物，其衍生的系列荧光钙离子指示剂均表现出钙离子浓度依赖性荧光特性。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC |
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC |
| Em： | FITC |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
溶液配制
除特别说明外，所有未使用的储备液均应分装为单次用量，配制后保存于-20°C，并避免反复冻融
Fluo-2 AM储备溶液配制
使用高质量无水DMSO制备2-5 mM 的Fluo-2 AM储备溶液。
工作溶液配制
Fluo-2 AM工作溶液
1.实验当天，将Fluo-2 AM溶解于DMSO或取储备液分装管恢复至室温
2.选用合适的缓冲液（如Hanks-Hepes缓冲液）配制2-20 μM工作液，并添加0.04% Pluronic® F-127表面活性剂。
针对多数细胞系，推荐4-5 μM终浓度，具体加载浓度需通过实验优化。
注：Pluronic F-127可增加Fluo-2 AM的水溶性。可从百萤购买各种Pluronic F-127溶液。
注：若细胞存在有机阴离子转运体，建议在工作液中添加1-2 mM丙磺舒（孔内终浓度0.5-1 mM）以防止水解产物外排。多种形式的丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，可从百萤购买。
操作步骤
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。本方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在生长培养基中培养细胞过夜。
2.次日，将1X Fluo-2 AM工作溶液添加到孔板中。
注意：若待测化合物与血清存在干扰，加载前需更换为新鲜HHBS缓冲液
3.将加入染料的孔板在37°C的细胞培养箱中培养30至60分钟。
注：部分细胞系延长孵育至2小时可增强信号强度
4.用含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）或HHBS缓冲液代替染料工作溶液，去除多余的探针。
5.使用FITC滤光片荧光显微镜（激发/发射490/525 nm，截止515 nm）或配备液体分配系统的酶标仪（如FDSS/FLIPR/FlexStation）进行实时荧光检测
