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荧光信号增强液 FluoroQuest

英文名称:FluoroQuest™ Fluorescence Signal Enhancing Solution
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件在零下15度以下保存
产品概述

荧光信号增强液 FluoroQuest 是美国AAT Bioquest生产的荧光信号增强液,当蛋白质与荧光有机染料偶联时,染料分子的荧光发射通常会降低,有时会降低50-70%。这种猝灭现象已经有数十年的历史了,但是,目前尚没有简单,实用的方法来控制与蛋白质结合的染料的荧光,特别是对于与免疫球蛋白结合的染料的荧光。我们提供此FluoroQuest 荧光信号增强解决方案,该解决方案在细胞成像和流量分析中可将荧光强度提高至2.5倍。这种实验方案提供了一种有效的方法来提高检测免疫学,组织化学和细胞生物学中使用的荧光有机标记的灵敏度。

 

适用仪器


荧光显微镜  
推荐孔板: 黑色透明
实验方案

样品实验方案

1.将细胞接种在滑动室或无菌玻璃盖玻片上,并根据需要处理细胞
2.进行甲醛固定。在室温下用PBS中的3.0–4.0%甲醛孵育细胞10–30分钟。
3.用PBS清洗固定的细胞2–3次。
可选:将PBS中的0.1%Triton X-100加入固定细胞中3至5分钟以增加通透性。用PBS冲洗细胞2-3次。
4.用封闭剂(例如在PBS中的5%BSA)封闭30分钟。
5.按照特定产品的数据表中的建议,在稀释缓冲液中稀释一抗。覆盖足够的稀释抗体以覆盖盖玻片上的细胞或腔室玻片的每个腔室。
6.用PBS清洗2-3次。
7.使用前,在室温下加热FluoroQuest™荧光信号增强溶液。
8.稀释荧光第二抗体在FluoroQuest™荧光信号在室温下增强溶液中,然后染色细胞1小时。对于大多数应用,IgG偶联物的二抗一般范围在0.1-10 µg / mL之间。保持盖玻片覆盖或在潮湿的室内避免蒸发。
9.用PBS洗涤细胞3次。
注意:在此步骤可以用荧光核染色剂或鬼笔环肽进行其他染色。
10.将每个盖玻片倒入带有安装介质的清洁幻灯片上,最好是带有抗褪色防腐剂的幻灯片。如果需要,用透明的抛光剂密封边缘。
11.在显微镜下用正确的滤光片对细胞成像。将幻灯片存放在4°C的黑暗处。

 

参考文献

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