荧光信号增强液 FluoroQuest

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产品介绍

当蛋白质与荧光有机染料结合时，染料分子的荧光发射通常会减弱，有时衰减幅度可达50%-70%。这种荧光淬灭现象已被认知数十年，但迄今为止仍缺乏简单实用的方法来控制与蛋白质（尤其是免疫球蛋白）结合的染料荧光。

AAT Bioquest的这款FluoroQuest™荧光信号增强溶液，可在细胞成像和流式分析中将荧光信号最高提升2.5倍。该即用型溶液为免疫学、组织化学和细胞生物学研究中使用的荧光有机标记物提供了一种有效提高检测灵敏度的方法。

样品实验方案

1.将细胞接种在滑动室或无菌玻璃盖玻片上，并根据需要处理细胞

2.进行甲醛固定。在室温下用PBS中的3.0–4.0％甲醛孵育细胞10–30分钟。

3.用PBS清洗固定的细胞2–3次。

可选：将PBS中的0.1％Triton X-100加入固定细胞中3至5分钟以增加通透性。用PBS冲洗细胞2-3次。

4.用封闭剂（例如在PBS中的5％BSA）封闭30分钟。

5.按照特定产品的数据表中的建议，在稀释缓冲液中稀释一抗。覆盖足够的稀释抗体以覆盖盖玻片上的细胞或腔室玻片的每个腔室。

6.用PBS清洗2-3次。

7.使用前，在室温下加热FluoroQuest™荧光信号增强溶液。

8.稀释荧光二抗在FluoroQuest™荧光信号在室温下增强溶液中，然后染色细胞1小时。对于大多数应用，IgG偶联物的二抗一般范围在0.1-10 µg / mL之间。保持盖玻片覆盖或在潮湿的室内避免蒸发。

9.用PBS洗涤细胞3次。

注意：在此步骤可以用荧光核染色剂或鬼笔环肽进行其他染色。

10.将每个盖玻片倒入带有安装介质的清洁幻灯片上，最好是带有抗褪色防腐剂的幻灯片。如果需要，用透明的抛光剂密封边缘。

11.在显微镜下用正确的滤光片对细胞成像。将幻灯片存放在4°C的黑暗处。