钙离子荧光探针Indo1AM（超级纯） CAS 112926-02-0
| Ex (nm) | 330 | Em (nm) | 404 |
| 分子量 | 1009.91 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
咨询
产品优势
1.相较于单波长钙探针，能有效减少染料负载量差异、细胞渗漏及光漂白等因素的干扰。
2与钙离子结合后发射峰从480 nm显著蓝移至400 nm，实现高灵敏度定量检测
3.仅需单一紫外激发光源（如351-364 nm氩离子激光谱线），简化实验配置
4.适用于荧光显微镜、光谱分析、酶标仪及流式细胞术等多种检测平台
5.背景干扰极低，检测灵敏度优异
适用范围
用于钙离子检测
产品介绍
Indo-1 AM 基于其独特的钙结合发射光谱位移原理（未结合Ca²⁺时发射峰480 nm，结合后位移至400 nm）。该探针具有高钙离子亲和力（解离常数Kd ~230 nM），能灵敏响应细胞内瞬时钙离子浓度变化，通过实时发射比例测量实现钙流动态定量分析。其激发发射特性特别适合多种应用场景，尤其是流式细胞检测——仅需采用氩离子激光器351-364 nm谱线等单一紫外激发源即可工作。该探针具有极低背景信号，能为复杂细胞实验提供可靠且可重复的检测结果。
Indo-1 AM 是一种紫外光激发、细胞膜通透型的比率钙离子荧光探针，专用于检测细胞内钙离子浓度变化。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | indo 滤波片组 |
| Em： | indo 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 340 nm |
| Em： | 400,475 nm |
| Cutoff： | Ex/Em = 340/400, no cut off. Ex/Em = 340/475, cut off 455 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
溶解方案(溶剂以说明书为准)
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 99.019 µL | 495.094 µL | 990.187 µL | 4.951 mL | 9.902 mL |
| 5 mM | 19.804 µL | 99.019 µL | 198.037 µL | 990.187 µL | 1.98 mL |
| 10 mM | 9.902 µL | 49.509 µL | 99.019 µL | 495.094 µL | 990.187 µL |
操作步骤
储备液配制
所有未使用的储备液（除非另有说明）应在配制后分装成单次使用量，并于-20°C保存。避免反复冻融。
Indo-1 AM储备液
使用优质无水DMSO配制2至5 mM的Indo-1 AM储备液。
工作液配制
Indo-1 AM工作液
实验当天，将Indo-1 AM溶解于DMSO或解冻储备液至室温。
选用合适缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液），加入0.04% Pluronic® F-127，配制2至20 µM的Indo-1 AM工作液。对多数细胞系，推荐终浓度为4-5 μM。具体染料负载浓度需通过实验优化。
注意：1.非离子型表面活性剂Pluronic® F-127可增强Indo-1 AM水溶性，AAT Bioquest提供多种Pluronic® F-127溶液。
2.若细胞存在有机阴离子转运体，可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒（孔板内终浓度0.5-1 mM）以减少去酯化染料的渗漏。AAT Bioquest提供多种ReadiUse™丙磺舒产品（包括水溶型、钠盐及稳定化溶液）。
标准实验流程
以下为活细胞加载AM酯的推荐方案，请根据实际需求调整：
1.在生长培养基中培养细胞过夜。
2.次日向细胞板加入1X Indo-1 AM工作液。
注意：若待测化合物与血清存在干扰，加载染料前需更换为新鲜HHBS缓冲液。
3. 37°C细胞培养箱中孵育30-60分钟。
注意：部分细胞系延长孵育时间（>1小时）可增强信号强度。
4.移除工作液，更换为HHBS或自选缓冲液（如适用，可含1 mM丙磺舒等阴离子转运体抑制剂）。
5.加入刺激剂后，可选用配置Indo-1专用滤光片组的荧光显微镜，或搭载可编程液体处理系统（如FlexStation）的荧光酶标仪。
检测参数设置为：第一通道激发/发射波长340/400 nm（无截止滤光），第二通道激发/发射波长340/475 nm（455 nm截止滤光）。
