LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针

产品货期

咨询

 

产品优势  

1.特异性强：利用溶酶体 pH 梯度，选择性积聚在溶酶体，实现特异性染色

2.荧光特性好：信噪比高，光稳定性强，进入溶酶体后荧光显著增强

3.细胞适用性广：适用于增殖与非增殖细胞，以及悬浮细胞和贴壁细胞

 

适用范围

用于标记活细胞

 

产品介绍

溶酶体是细胞内含有酸性水解酶的膜性细胞器，能够分解代谢废物、细胞残骸、老化细胞器、食物颗粒以及被吞噬的病原体。其独特的膜结构维持着pH4.5的酸性内环境（胞质pH7.2），这一pH梯度通过质子泵和氯离子通道的协同转运得以实现。

LysoBrite™NIR探针正是利用溶酶体的pH梯度特性实现选择性积聚——该疏水性化合物可自由穿透活细胞膜，在进入溶酶体后荧光强度显著增强。这一特性使其具有极低的染色背景，广泛应用于细胞粘附、趋化性、多药耐药、细胞活力、凋亡及毒性等研究领域，适用于各类增殖/非增殖细胞、悬浮/贴壁细胞。

 

注意事项

标记后不能固定细胞

使用LysoBrite 染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟

洗涤细胞

在荧光显微镜下分析

 

LysoBrite™ NIR工作液配制：

1.解冻 LysoBrite NIR染料至室温。

2.将20μL的500 X LysoBrite NIR染料，用10 mL 含 20 mM HEPES 的 Hank's 缓冲液（HBSS）或您选择的其他缓冲液进行稀释。

注意：1. 20μL的LysoBrite NIR染料足够用于一块96孔板。将未使用完的LysoBrite NIR染料原液进行分装＜-15 ℃避光保存。避免反复冻融。

          2.荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

样品实验方案

（本方案仅提供指导原则，应根据您的具体需求进行调整。）

贴壁细胞染色方案

1. 使用96孔黑色壁/透明底板（每孔100μL培养基）或于培养皿内的盖玻片上培养

2. 待细胞达到目标汇合度后，加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）

3. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟

4. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基

5. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察

注：若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

 

悬浮细胞染色方案

1. 直接加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）

2. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟

3. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基

4. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察

注：1.若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

       2.悬浮细胞可通过BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理贴附于盖玻片后，参照贴壁细胞方案染色

 

试剂应用文献

Phasor-FSTM: a new paradigm for multicolor super-resolution imaging of living cells based on fluorescence modulation and lifetime multiplexing
Authors: Wang, Luwei and Chen, Yue and Guo, Jiaqing and Weng, Xiaoyu and Yan, Wei and Song, Jun and Ye, Tong and Qu, Junle
Journal: Light: Science \& Applications (2025): 32