胰凝乳蛋白酶荧光底物MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC
英文名称:MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC
产品参数
Ex (nm) | 341 | Em (nm) | 441 |
分子量 | 819.78 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品概述
产品货期
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产品优势
灵敏度高
产品介绍
MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC是一种用于糜蛋白酶样蛋白酶的高灵敏度荧光底物。该无荧光底物酶解后可产生明亮的蓝色荧光AMC产物,其发射光谱可通过DAPI滤光片组轻松检测,目前已应用于角质层糜蛋白酶(SCCE)的蛋白酶活性监测。
实验方案
储备液配制
除非另有说明,所有未使用的储备液应在配制后分装成单次使用 aliquot,并于-20°C 保存。避免反复冻融。
MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC 以冻干粉形式提供。配制 10 mM 储备液时,取 1 mg 该化合物溶于 122 µL DMSO 中。
工作液配制
使用反应缓冲液(100 mM Tris-HCl,pH 8.0,含 0.4 M NaCl 和 0.1% Triton X-100)将底物工作液终浓度配制为 20–50 µM。
注意:MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC 工作液需现用现配,并避光保存。
实验操作流程
Well
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Volume
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STD1-STD7
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50 µL AMC serial dilutions (0.078 µM-10 µM)
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BL
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50 µL reaction buffer
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Test Sample
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50 µL
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Sample Buffer Control
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50 µL of the buffer that the test sample is in
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1.按上表布局制备 AMC 标准品(STD1-STD7)、空白对照(BL)及测试样本
2.向「测试样本」和「样本缓冲液对照」孔中各加入 50 µL 工作液
3.向 STD1-STD7 和 BL 孔中各加入 50 µL 反应缓冲液
4.避光条件下室温孵育 30-60 分钟(或使用动力学模式实时监测)
5.于 Ex/Em=360/470 nm(截止波长=435 nm)检测荧光信号