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MitoLite 线粒体红色荧光探针(FX600)

英文名称:MitoLite™ Red FX600
产品参数
Ex (nm)580Em (nm)598
分子量N/A溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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产品优势  

1.高特异性:依赖于线粒体膜电位(ΔΨm)选择性积聚在活性线粒体中

2.细胞兼容性:适用于增殖细胞、非增殖细胞,兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。

3.稳定性好:抗光漂白能力强,适合长时间活细胞成像

4.高信噪比:与普通细胞质染料相比,信噪比更高,成像更清晰

 

适用范围

用于标记活细胞

 

产品介绍

MitoLite 线粒体红色荧光探针是一种阳离子染料,能够通过线粒体膜电位梯度选择性地在线粒体内积聚。该线粒体荧光指示剂是一种疏水性化合物,可轻松穿透完整活细胞的细胞膜,进入细胞后被捕获在线粒体中。由于该指示剂带有细胞滞留基团,能够在线粒体内长时间保留,这一关键特性提高了其染色效率。其标记方案稳定可靠,操作简便耗时短,可用于多种荧光检测平台,包括微孔板检测、免疫细胞化学和流式细胞术等,既适用于增殖细胞也适用于非增殖细胞,同时兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测

 

注意事项

该产品可以在染色后,进行固定,在观察

实验方案

MitoLite 染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

清洗细胞

在荧光显微镜下分析

 

操作步骤

1.线粒体染色工作液配制:

1.1 将MitoLite™染料恢复至室温

1.2 取20 μL 500×MitoLite™染料母液,用Hanks(含20 mM Hepes缓冲液)或自选缓冲液稀释至10 mL,配制成工作浓度

注1:20 μL染料母液可满足1块96孔板使用。未使用的母液需分装后于-15℃以下避光保存,避免反复冻融

注2:理想染色浓度需根据具体应用调整,可根据细胞类型及探针渗透性优化染色条件

 

2.细胞染色步骤:

2.1 贴壁细胞染色:

a) 将细胞培养于96孔黑色壁/透明底培养板(100 μL/孔)或培养皿内的盖玻片上

b) 待细胞达到合适密度后,加入等体积染色工作液(步骤1.2配制)

c)将细胞在 37℃、5% CO2培养箱中孵育30分钟至2小时

d) 更换染料上样溶液,或用预热(37℃)的Hanks(含20 mM Hepes缓冲液,HBSS)或自选缓冲液(如1:1稀释的培养基)洗涤细胞(特别是货号#22679产品)。随后向细胞培养孔中加入HBSS缓冲液或培养基。

e) 使用适配滤光片的荧光显微镜观察细胞

注意:若染色不足,可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

2.2 悬浮细胞染色:

a) 1000 rpm离心5分钟收集细胞,弃上清

b) 用预热(37℃)培养基重悬细胞,加入等体积染色工作液(步骤1.2)

c) 将细胞在37℃、5% CO2培养箱中孵育30分钟至2小时

d) 更换染料上样溶液,或用预热(37℃)的Hanks(含20 mM Hepes缓冲液,HBSS)或自选缓冲液(如1:1稀释的培养基)洗涤细胞(特别是货号#22679产品)。随后向细胞培养孔中加入HBSS缓冲液或培养基。

e) 使用适配滤光片的荧光显微镜观察细胞

注意:1.若染色不足,可适当提高染料浓度或延长孵育时间

          2.悬浮细胞可使用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理盖玻片后,参照贴壁细胞方法染色

 

试剂应用文献

Mustard Meal Extract as an Alternative to Zinc Oxide for Protecting the Intestinal Barrier Against E. coli-Lipopolysaccharide Damage
Authors: Taranu, Ionelia and Pistol, Gina Cecilia and Gras, Mihai Alexandru and Ciupitu, Ana-Maria and Grosu, Iulian Alexandru and Vlassa, Mihaela and Filip, Miuta and Marin, Daniela Eliza
Journal: International Journal of Molecular Sciences (2024): 273
 
Quercetin Promotes Apoptosis of Gastric Cancer Cells through the EGFR-ERK Signaling Pathway
Authors: Liu, Yali and Li, Yan and Jiang, Yanjun and Zheng, Xin and Wang, Tianming and Li, Jing and Zhang, Biyun and Zhu, Jiarui and Wei, Xintong and Huang, Ruihua and others,
Journal: Journal of Food Biochemistry (2024)