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MycoLight Red JJ94核酸染料

英文名称:MycoLight™ Red JJ94 *2.5 mM in DMSO*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量738.75溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

MycoLight Red JJ94核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,绿色荧光蛋白(GFP)衍生物广泛用作荧光试剂,在细胞和分子水平上研究生物过程,包括标记细菌等。然而,基于绿色荧光蛋白的细菌标记是单一的,而且一些重要的生物体仍然难以被修饰并表达。SYTO-9被开发广泛用于以更方便的方式标记细菌,即通过简单的培养。但,据报道SYTO-9能抑制一些细菌的生长。AAT Bioquest开发了与SYTO-9性能相似的Myoclight JJ94 红色染料,而且它对细菌生长抑制非常低。另外,MycoLight JJ94 红色染料可用于细菌的多色检测,它的激发和发射波长分别为637和651nm。这与大多数荧光显微镜和流式细胞仪中常用的氦激光激发和Cy5滤光片完全匹配。MycoLight JJ94 红色染料是一种远红色荧光DNA结合染料,用于直接的活细菌细胞标记,它自身荧光较低,但与DNA结合后,其荧光强度急剧增加。MycoLight JJ94 红色染料在不影响微生物生长的情况下,很容易染上活细菌。在相同的条件下,SYTO-9抑制细菌生长,而MycoLight JJ94 红色染料与正常细菌在液体或固体培养基上生长完全一致。将细菌转移到无染料培养基中后,MycoLight Red JJ94进行的细菌荧光标记可在数小时内保持稳定。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight Red JJ94核酸染料。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 640 nm
Em: 660/20 nm 
通道: APC通道

 


荧光显微镜
Ex: 630nm 滤波片组
Em: 660nm 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  • 在不影响正常微生物生长的情况下染色活细菌
  • 使用Cy5滤光片组和He激光激发,可在大多数流式细胞仪和荧光显微镜中广泛使用
  • 可用于细菌中的多色检测
  • 稳定标记数个小时

 

操作步骤

  1. 使用自备缓冲液稀释MycoLight Red JJ94。MycoLight Red JJ94可以直接添加到细菌培养基中,浓度为2.5 µM。
  2. 涡旋混合样品,然后孵育至少10分钟。
  3. 通过荧光显微镜或带有Cy5滤波器的流式细胞仪检测样品的荧光信号。

注意1:  以上方案可适用于大多数细菌菌株。这些条件需要针对每个菌株和实验系统进行调整。生长培养基,细胞密度,其他生物的存在和因素可能会影响染色。玻璃器皿上残留的洗涤剂也可能会影响许多生物的染色。注意2:  稀释MycoLight Red JJ94时请使用塑料管,因为稀释的污渍会粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中可获得结果。 注意3:  可以使用不同的细菌菌株优化染料浓度以获得结果。 注意4:  MycoLight Red JJ94与细菌的生长完全兼容,可以将活细菌与MycoLight Red JJ94长时间孵育。

 

图示

图1. 随时间推移补充了1%DMSO(对照),MycoLight Red JJ94和Syto-9 的大肠杆菌 LB培养物的光密度(OD600 nm)对比。Syto-9 基本上抑制细菌生长,而MycoLight Red JJ94与正常细菌生长完全相容。

图2.用2.5μM MycoLight Red JJ94将庆笙红球菌染色20分钟。 用具有Cy5滤光片组的Keyence荧光显微镜拍摄图像。

 

 参考文献

A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for Strongyloides stercoralis in stool that uses a visual detection method with SYTO-82 fluorescent dye
Authors: Watts MR, James G, Sultana Y, Ginn AN, Outhred AC, Kong F, Verweij JJ, Iredell JR, Chen SC, Lee R.
Journal: Am J Trop Med Hyg (2014): 306

A new triplex real time PCR which distinguishes between MRSA, MSSA, and mecA coagulase negative strains by means of melting point analysis using SYTO 9
Authors: Weidner J, Cassens U, Gohde W, Wullenweber J, Greve B.
Journal: Clin Lab (2013): 795

Compatibility of SYTO 13 and Hoechst 33342 for longitudinal imaging of neuron viability and cell death
Authors: Hubbard KS, Gut IM, Scheeler SM, Lyman ME, McNutt PM.
Journal: BMC Res Notes (2012): 437

Evaluation of Pseudomonas aeruginosa (PAO1) adhesion to human alveolar epithelial cells A549 using SYTO 9 dye
Authors: Larrosa M, Truchado P, Espin JC, Tomas-Barberan FA, Allende A, Garcia-Conesa MT.
Journal: Mol Cell Probes (2012): 121

Rapid quantification of cell viability and apoptosis in B-cell lymphoma cultures using cyanine SYTO probes
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 81

SYTO dyes and EvaGreen outperform SYBR Green in real-time PCR
Authors: Eischeid AC.
Journal: BMC Res Notes (2011): 263

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using double duplex real-time PCR and dye Syto 9
Authors: Seputiene V, Vilkoicaite A, Armalyte J, Pavilonis A, Suziedeliene E.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2010): 502

Use of SYTO 13, a fluorescent dye binding nucleic acids, for the detection of microparticles in in vitro systems
Authors: Ullal AJ, Pisetsky DS, Reich CF, 3rd.
Journal: Cytometry A (2010): 294

Assessment of acridine orange and SYTO 16 for in vivo imaging of the peritoneal tissues in mice
Authors: Udovich JA, Besselsen DG, Gmitro AF.
Journal: J Microsc (2009): 124

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706