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MycoLight Red JJ94核酸染料

英文名称:MycoLight™ Red JJ94 *2.5 mM in DMSO*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量738.75溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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产品优势

1.与常用的SYTO-9染料相比,MycoLight™ Red JJ94基本不抑制细菌生长,无论是在液体还是固体培养基中,都能保证细菌的正常生理状态。

2.该染料本身荧光很弱,但与细菌DNA结合后,荧光强度会急剧增强,信噪比高,检测灵敏度好。

3.将细菌转移到无染料的培养基中后,荧光标记仍能稳定数小时,为观察和实验提供了足够的时间窗口。

 

适用范围

用于直接标记活菌细胞

 

产品介绍

绿色荧光蛋白(GFP)及其衍生物作为荧光报告基因被广泛应用于细胞和分子水平的生物学过程研究,包括细菌标记。然而,基于GFP的细菌标记过程繁琐,且一些重要菌种难以被改造成可表达荧光蛋白

作为GFP细菌荧光标记的补充,SYTO-9以其便捷的标记方式(仅需简单孵育)而被广泛应用。但据报道,SYTO-9会显著抑制某些细菌的生长。AAT Bioquest公司开发的MycoLight™ Red JJ94染料,在与SYTO-9相比时,对细菌生长的抑制小。

MycoLight™ Red JJ94可与常用的GFP探针配合,用于细菌的多色检测。其激发和发射波长分别约为637 nm和651 nm,这与大多数荧光显微镜和流式细胞仪普遍配备的氦激光器激发源及Cy5滤光片组完美匹配。

MycoLight™ Red JJ94是一种远红色荧光DNA结合染料,可用于直接标记活菌细胞,以便进行后续的感染研究。其本身荧光微弱,但一旦与DNA结合,荧光发射强度会急剧增强。该染料能够轻松地对活菌进行染色,且不影响微生物的生长。在相同条件下,SYTO-9会显著抑制细菌生长,而MycoLight™ Red JJ94在液体或固体培养基中均与细菌的正常生长完全兼容。将经MycoLight™ Red JJ94标记的细菌转移至无染料培养基后,其荧光标记可稳定数小时。

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 640 nm
Em: 660/20 nm 
通道: APC通道

 


荧光显微镜
Ex: 630nm 滤波片组
Em: 660nm 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  • 在不影响正常微生物生长的情况下染色活细菌
  • 使用Cy5滤光片组和He激光激发,可在大多数流式细胞仪和荧光显微镜中广泛使用
  • 可用于细菌中的多色检测
  • 稳定标记数个小时

 

操作步骤

  1. 使用自备缓冲液稀释MycoLight Red JJ94。MycoLight Red JJ94可以直接添加到细菌培养基中,浓度为2.5 µM。
  2. 涡旋混合样品,然后孵育至少10分钟。
  3. 通过荧光显微镜或带有Cy5滤波器的流式细胞仪检测样品的荧光信号。

注意1:  以上方案可适用于大多数细菌菌株。这些条件需要针对每个菌株和实验系统进行调整。生长培养基,细胞密度,其他生物的存在和因素可能会影响染色。玻璃器皿上残留的洗涤剂也可能会影响许多生物的染色。

注意2:  稀释MycoLight Red JJ94时请使用塑料管,因为稀释的污渍会粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中可获得结果。 

注意3:  可以使用不同的细菌菌株优化染料浓度以获得结果。 注意4:  MycoLight Red JJ94与细菌的生长完全兼容,可以将活细菌与MycoLight Red JJ94长时间孵育。