英文flag致电:029-68064558
搜索

PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒 *蓝色*

英文名称:PhosphoWorks™ Colorimetric Phosphate Assay Kit *Blue Color*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件在2-8度冷藏保存, 避免光照
产品概述

PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测磷酸盐的试剂盒,磷酸盐参与许多生物反应。例如,磷酸酶,ATP酶和几种其他酶催化无机磷酸盐(Pi)从底物释放的反应。 这种PhosphoWorks 磷酸盐检测试剂盒是为测量任何产生磷的酶的活性而开发的。 该试剂盒的配方可灵敏检测Pi,为危险的放射性方法和其他灵敏度较低的比色分析提供了替代方案。 Pi的测量基于在钼酸盐存在下孔雀石绿衍生物的吸光度变化。 与其他孔雀石染料配方不同,该试剂盒可提供完全稳定的终点信号,不易沉淀。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒。 

 

适用仪器


分光光度计  
吸收: 600-660nm
推荐孔板: 透明底板
光吸收酶标仪  
吸收: 600-660nm
推荐孔板: 透明底板
实验方案

操作步骤

简要概述

准备测试样品或磷酸盐标准品(80μL)
添加MG Plus 试剂(组分B)(20μL)
在室温下孵育10-40分钟
监测600-660nm的吸光度或分光光度计

 

制备标准溶液

磷酸盐标准配制

在950μL去离子水或酶反应缓冲液中加入50μL1mM磷酸盐标准品(组分A),得到50μM磷酸盐标准溶液(PS7)。 取50μM磷酸盐标准溶液(PS7)并进行1:2连续稀释,用去离子水或酶反应缓冲液获得连续稀释的磷酸盐标准品(PS6-PS1)。

 

样品实验方案

 

表1.透明96孔微孔板中磷酸盐标准品和测试样品的布局。

PS =磷酸盐标准品(PS1-PS7,0.78至50μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
PS1 PS1 ... ...
PS2 PS2 ... ...
PS3 PS3    
PS4 PS4    
PS5 PS5    
PS6 PS6    
PS7 PS7    

 

表2.每个孔的试剂组成。

规格 试剂
PS1-PS7 80ul 连续稀释液(0.78至50μM)
BL 80ul 不含磷酸盐的水或缓冲液
TS 80ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备磷酸盐标准品(PS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用40μL试剂代替80μL。

2.使用前摇匀MG Plus 试剂(组分B)。

3.向磷酸盐标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入20μLMGPlus™试剂(组分B),使总磷酸盐测定体积为100μL/孔。彻底混合试剂。对于384孔板,在每个孔中加入10μLMGPlus™试剂(组分B),总体积为50μL/孔。

4.在含磷酸盐的孔中将在10至40分钟内产生蓝绿色。使用吸光度酶标仪在600 - 660 nm处监测吸光度或使用分光光度计。注意:在高磷酸盐浓度(>100μM)下,可能会形成沉淀。稀释样品并重新进行分析。注意:对于需要总体积大于100μL的比色皿测定,在测量吸收之前,将样品体积和MG Plus 试剂(组分B)按比例加倍或用1M H 2 SO 4或1M HCl稀释最终反应混合物。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(吸光度)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算磷酸盐样品。 我们建议使用在线线性回归计算器(点击查看)

图1.使用SpectraMax Plus酶标仪(Molecular Devices),在透明的96孔板上用PhosphoWorks 比色磷酸盐测定试剂盒测量磷酸盐剂量响应。

 

参考文献

Modulating bone regeneration in rabbit condyle defects with three surface-structured tricalcium phosphate ceramics
Authors: Rongquan Duan, Davide Barbieri, Florence de. groot, Joost de. bruijn, Huipin Yuan
Journal: ACS Biomaterials Science & Engineering (2018)

Variation of bone forming ability with the physicochemical properties of calcium phosphate bone substitutes
Authors: Rongquan Duan, Davide Barbieri, Xiaoman Luo, Jie Weng, Chongyun Bao, Joost De Bruijn, Huipin Yuan
Journal: Biomaterials Science (2017)

Influence of surface microstructure and chemistry on osteoinduction and osteoclastogenesis by biphasic calcium phosphate discs.
Authors: NL Davison, J Su, H Yuan, JJJP van den Beucken, JD de Bruijn
Journal: (2015)

Submicron-scale surface architecture of tricalcium phosphate directs osteogenesis in vitro and in vivo
Authors: NL Davison, X Luo, T Schoenmaker, V Everts, H Yuan, F Barrere-de Groot, JD de Bruijn
Journal: Eur Cell Mater (2014)

Zinc in calcium phosphate mediates bone induction: in vitro and in vivo model
Authors: Xiaoman Luo, Davide Barbieri, Noel Davison, Yonggang Yan, Joost D de Bruijn, Huipin Yuan
Journal: Acta biomaterialia (2014): 477--485

 

相关产品

产品名称 货号
PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒 Cat#21617
PhosphoWorks 荧光法磷酸盐检测试剂盒 *红色荧光* Cat#21660