PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*

产品货期

咨询

产品优势

1.灵敏度高

2.可保持长达4小时的稳定发光信号

适用范围

用于ATP检测

产品介绍

三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量学、代谢调控及细胞信号传导中发挥着核心作用。PhosphoWorks™ ATP检测试剂盒提供了一种快速、简便且均质的发光检测方法，用于测定哺乳动物细胞的增殖与细胞毒性。该检测可采用便捷的96孔和384孔微孔板形式进行，其高灵敏度特性支持对多种生物系统、环境样本及食品中ATP的检测。本试剂盒不含DTT，可保持长达4小时的稳定发光信号，检测过程中无需混合操作或分离步骤，其配方设计显著减少了实际操作时间。

操作步骤

简要概述

1.准备含有测试化合物的细胞（样品）（96 孔板每孔 100 µL，384 孔板每孔 25 µL）

2.加入等体积的 ATP 工作液（96 孔板每孔 100 µL，384 孔板每孔 25 µL）

3.在室温下孵育10-20分钟

4.监测发光强度

重要注意事项
为获得好的实验结果，建议使用白色微孔板。所有试剂组分需在实验前室温解冻。

制备工作溶液

1.将10 mL反应缓冲液（组分C）转移到ATP探针（组分B）中并充分混合。

2.将20μLATP监测酶（组分A）加入到B + C的混合液中 混匀制成ATP工作液

注意：避免外源性生物物质可能造成的ATP污染

细胞样本制备指南请参阅：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

样品实验方案

ATP检测步骤：

1.处理细胞样本时，96孔板每孔加入10 µL 10X浓度化合物工作；384孔板每孔加入5 µL 5X浓度化合物工作液（使用所需化合物缓冲液配制）；空白孔（仅培养基无细胞）加入对应体积的化合物缓冲液

2.将细胞培养板置于37°C、5% CO2培养箱中孵育所需时间（如24、48或96小时）

3.每孔加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）ATP工作液

4.在室温下孵育10-20分钟。

5.用标准发光计监测发光强度。

生成标准ATP校准曲线：

 如需计算样本中ATP绝对含量，需同步制作ATP标准曲线

1.用含0.1% BSA的PBS缓冲液配制系列浓度ATP标准品（需包含无ATP对照管以检测本底发光值）。

注意：典型ATP浓度范围建议为0.1 nM至1 µM

2.取等量ATP标准品溶液加入空白微孔板（96孔板每孔100 µL，384孔板每孔25 µL）

3.每孔加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）ATP工作液

4.将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

5.用标准发光计记录发光强度。

6.绘制ATP标准曲线

试剂应用文献