pH荧光探针Protonex 绿 500 Dextran检测胞吞作用

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产品优势

1.该染料在细胞外无荧光，实验过程中无需洗涤步骤

2.特异性标记酸性细胞器，降低信号变异，提升成像或流式应用的检测准确性。

适用范围

用于细胞pH值监测

产品介绍

Protonex™ Green染料展现出独特的pH依赖性荧光特性。与多数在碱性环境下荧光更强的传统染料不同，该染料在酸性条件(pH降低)下荧光显著增强，从中性到酸性环境呈现明显的荧光递增效应。其细胞外无荧光的特性可省去洗涤步骤，成为监测内体、溶酶体等酸性细胞区室的理想工具。该染料在细胞外保持非荧光状态，仅在吞噬体、溶酶体等酸性区室内发出明亮绿色荧光，能显著降低信号变异，为显微成像和流式检测提供高精度结果。

Protonex™ Green的光谱特性与FITC高度相似，可直接使用常规FITC滤光片组进行检测，兼容现有实验设备。这种特殊设计使其成为研究细胞内膜运输、吞噬作用及溶酶体功能的优选探针，特别适合需要长时间活细胞观察的实验体系。

操作步骤

1.根据需要准备细胞。例如，将贴壁细胞在生长培养基中以40,000至80,000细胞/孔/100μL过夜  

对于384孔板，96孔或10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定佳细胞密度。

2.准备RatioWorks Protonex 绿色葡聚糖装载解决方案：

2.1在1 mL 无菌水或Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）中制备1mg / mL Protonex 绿色葡聚糖原液。应立即使用原液。任何未使用的溶液需要等分并在< -20 ^o C重新冷冻。

注意：避免反复冻融循环，避免光照。

2.2在HHBS中制备20-100ug / mL Protonex 绿色葡聚糖加载溶液。

3.运行内吞作用测定

3.1取出培养基，将100μL/孔（96孔板）或25μL /孔（384孔板） Protonex Green Dextran 上样溶液加入细胞板（步骤2.2）。

注1：如果您的化合物干扰血清，重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基（96孔板100μL/孔或染料加载前384孔板25μL/ 孔）。

注2： Protonex 绿色葡聚糖从早期内体快速运输到晚期内体，随后可能与溶酶体融合。为了帮助在内体中可视化Protonex 绿色葡聚糖，我们建议增加标记浓度并减少加载时间，并立即成像。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育5至20分钟。

3.3用HHBS或生长培养基清洗并更换染料加载溶液。

3.4通过监测Ex / Em = 443/505 nm处的荧光来进行胞吞作用测定。