pH荧光探针Protonex 红600-乳胶微珠偶联物

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产品优势

特异性地检测细胞内的酸性区室，降低信号变异，提高成像和流式检测的准确性

适用范围

用于细胞pH值监测

产品介绍

Protonex™ Red-乳胶微球偶联物展现出显著的pH依赖性荧光特性。与多数在碱性条件下荧光更强的传统染料不同，该偶联物在酸性环境中荧光信号会显著增强。当pH从中性降至酸性范围时，其荧光强度呈现急剧升高，这一特性使其成为研究吞噬作用及其受药物/环境因素调控的可靠工具。

该偶联物在细胞外仅呈现微弱荧光（无需洗涤步骤），但在吞噬体、溶酶体和内体等酸性区室中会发出明亮的红色荧光。这种独特的"酸性激活"特性使其能够：1）精准示踪吞噬过程；2）与GFP、Fluo-8、钙黄绿素或FITC标记抗体等绿色荧光探针联用，实现多功能细胞分析；

Protonex™ Red的光谱特性与Texas Red高度相似，可直接使用Texas Red标准滤光片组进行检测，确保实验设备的即用性。

实验操作流程样本

重要说明：本方案针对粒细胞设计，仅供参考。实际操作需根据具体实验条件进行优化调整。

实验步骤

1.将粒细胞重悬于含20 mM Hepes的Hanks缓冲液（HHBS）中，调整浓度至10⁷ cells/mL，取100 μL细胞悬液加入聚丙烯离心管

注：最佳细胞密度需根据细胞系特性单独评估。

2.向离心管中加入1-10 μL Protonex™ Red 600-乳胶微球偶联物，37°C温和振荡孵育30分钟

注：合适的孵育时间需根据细胞系特性优化。

3.平行设置4°C孵育的相同样品作为对照

4.加入2 mL预冷HHBS缓冲液终止吞噬作用，充分混匀，用冷HBSS缓冲液洗涤细胞2次

5.用500 μL冷HBSS重悬细胞，4°C保存

6.立即使用配备Texas Red®滤光片组的荧光显微镜观察

注：若使用荧光酶标仪，检测参数设为：激发/发射=570/600 nm（截止波长585 nm）