Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒

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产品优势

1.灵敏度高，每孔可检测到 50 个细胞

2.信号稳定，半衰期超过 2 小时

适用范围

用于ATP检测

产品介绍

ATP（三磷酸腺苷）在细胞能量代谢、代谢调控和细胞信号传导中发挥着基础性作用。ATP的定量检测可应用于多种生物学场景。由于ATP是几乎所有生物体的能量来源，且在无活性生物体存在时会快速降解，因此其存在可用于指示活性生物体的存在。ATP测量技术已被广泛应用于细胞毒性检测、物体表面细菌监测、水体细菌定量、培养体细胞计数以及食品质量评估等领域。

利用萤火虫生物发光法检测ATP的技术由McElroy首次提出，他发现了ATP在发光反应中的关键作用。萤火虫荧光素酶是一种分子量为61 kDa的单体酶，通过催化荧光素的两步氧化反应，产生560 nm波长的光。第一步：ATP激活酶蛋白形成高活性的混合酸酐中间体；第二步：该中间体与氧反应生成一种瞬态的二氧杂环丁烷，该物质会迅速分解为氧化产物氧化荧光素和二氧化碳，同时释放出一阵光。当ATP是限制因子时，发光强度与ATP浓度成正比。因此可使用 luminometer通过测量光强度来定量 ATP。

AAT Bioquest的Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒（不含DTT）采用即用型设计。该试剂盒它为监测哺乳动物细胞的增殖和细胞毒性提供了一种快速、简便且均相的发光检测方法。其检测原理利用萤火虫荧光素酶催化ATP与荧光素反应产生光信号，支持96孔或384孔微孔板，兼容化学发光酶标仪平台。该检测灵敏度高，每孔可检测到 50 个细胞，其发光信号稳定，半衰期超过 2 小时。这款 ReadiUse™ 快速发光 ATP 检测试剂盒不含DTT。

操作步骤

简要概述

1.准备含测试化合物的细胞（样品），在 96 孔板中每孔加 100μL，在 384 孔板中每孔加 25μL。

2.加入等体积的即用型 ReadiUse™快速发光 ATP 检测试剂，96 孔板每孔加 100μL，384 孔板每孔加 25μL。

3.在室温下孵育10-20分钟

4.监测发光强度

注意：为达到好的效果，建议使用白色孔板。 在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

标准溶液制备

ATP 标准品

为方便操作，可使用系列稀释计算器：https://www.aatbio.com/tools/serial-dilution/21601

注：本试剂盒不提供 ATP。

用ddH2O或适当的缓冲液配制 1mM 的 ATP 储备液，然后进行系列稀释，得到浓度范围为 10pM 至 10μM 的 ATP 溶液。

有关细胞样品制备的指导，请访问：https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

样品实验方案

表1.白色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 SD = ATP标准，BL =空白对照，TS =测试样品

表2.每个孔的试剂组成