活性氧 ROS Brite APF

产品货期

现货

产品优势

相较于其他ROS，APF对羟自由基的选择性更高

适用范围

用于细胞内活性氧（ROS）检测

产品介绍

活性氧（ROS）是含氧的高活性化学分子，包括超氧化物、羟自由基、单线态氧和过氧化物等。由于外层电子未配对，ROS具有极强的反应活性。它是氧代谢过程中的天然副产物，在细胞信号传导和稳态调节中起重要作用。然而，在环境胁迫（如紫外线或高温）下，ROS水平会急剧升高，可能导致细胞结构严重损伤，这种现象统称为氧化应激。此外，电离辐射等外源因素也会产生活性氧。在氧化应激条件下，ROS的过量生成会改变膜脂质、蛋白质和核酸的结构，此类氧化损伤与衰老及多种病理过程相关，包括动脉粥样硬化、癌变、缺血再灌注损伤和神经退行性疾病等。

ROS Brite™ APF 是一种荧光探针，可通过常规荧光显微镜、高内涵成像、微孔板荧光检测或流式细胞术检测细胞内的羟自由基。该细胞膜通透性试剂本身无荧光，与羟自由基反应后发出亮绿色荧光。其荧光信号适用于多种检测手段，且在过氧化物酶存在时，APF还能与过氧化氢反应。相较于其他ROS，APF对羟自由基的选择性更高。APF及其类似物HPF对光致氧化的耐受性较强，仅在与羟自由基或过氧亚硝酸阴离子反应时才会产生荧光。此外，APF也可与次氯酸阴离子发生反应。

储备液配制说明

注意事项：

所有未使用的储备液均应分装为单次使用量，配制完成后保存于-20°C环境。需避免反复冻融。

ROS Brite™ APF储备液配制：

使用DMSO配制10-20 mM的ROS Brite™ APF储备液。

注：储备液可分装后-20°C避光保存。

工作液配制

ROS Brite™ APF工作液：

将DMSO储备液用含20 mM Hepes缓冲液的Hanks平衡盐溶液（HHBS）稀释至1-10 µM浓度。

注：工作液需现配现用。

标准实验操作流程

1.将细胞与1-10 µM ROS Brite™ APF工作液在37°C条件下孵育20-60分钟。

2.移除染液，用HHBS缓冲液洗涤。

3.使用荧光检测设备在激发/发射波长490/525 nm（截止波长515 nm）条件下进行检测（底部读数模式）。
适用设备：

荧光显微镜：建议使用FITC滤光片组

流式细胞仪：建议使用FL1通道

注意事项：

牛血清白蛋白（BSA）和酚红可能影响荧光信号，需谨慎使用

本探针既可用于溶液体系检测，也可用于细胞内测量