Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*

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产品介绍

钙流检测法是药物发现领域中筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的首选方法。Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*采用水溶性耐热丙磺舒成分，可有效抑制药物外排泵活性。该缓冲液能防止荧光染料（包括Indo-1 AM、Fura-2 AM、Fluo-3 AM、Fluo-4 AM、Fluo-8 AM、Rhod-2 AM和Rhod-4 AM等）从细胞中泄漏。

样品实验方案

1.使用前请将缓冲液置于室温解冻

2.配制1X Screen Quest™钙检测缓冲液：取1 mL 10X Screen Quest™钙检测缓冲液（含酚红™，货号#36301）加入9 mL HHBS缓冲液（1X Hank's液，含20 mM Hepes，pH 7.0），充分混匀
注：10 mL 1X缓冲液可满足一块检测板需求。未使用的10X缓冲液需分装保存于<-20°C环境，避光防反复冻融

3.配制细胞板用2X染料加载工作液：将DMSO重构的荧光钙染料（如Indo-1 AM、Fura-2 AM、Fluo-3 AM、Fluo-4 AM、Fluo-8 AM、Rhod-2 AM、Rhod-4 AM等）加入10 mL 1X Screen Quest™钙检测缓冲液（由步骤2制得），使目标孔内染料终浓度达到所需浓度的2倍，充分混匀。该工作液在室温下至少稳定2小时

4.向微孔板各孔加入与细胞培养基等体积的2X染料加载工作液（由步骤3制得）（例如96孔板每孔加100 μL，384孔板每孔加25 μL）

5.将细胞置于37°C、5% CO2培养箱中孵育约1小时（可根据实验需求调整时间）

6.使用HHBS或所需缓冲液制备化合物板

7.进行钙流检测实验