Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒
| Ex (nm) | 581 | Em (nm) | 593 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1. 无需丙磺舒，独特分子结构实现优异细胞滞留性，避免丙磺舒的细胞毒性
2.免洗步骤，简化操作流程
3.结合钙离子后，灵敏度远超传统探针
适用范围
用于钙离子检测
产品介绍
钙流检测作为药物研发中G蛋白偶联受体（GPCR）筛选的金标准方法，Screen Quest™ Calbryte-590™免丙磺舒免洗钙检测试剂盒提供了可靠的红色荧光均相检测方案。该试剂盒采用独家开发的Calbryte-590 AM探针——作为当前高通量筛选（HTS）中最明亮的钙离子指示剂，其脂溶性AM酯形式可有效穿透细胞膜，经细胞内酯酶水解后转化为带负电荷的荧光染料并稳定滞留于胞内。当筛选化合物激活GPCR引发钙释放时，探针与钙离子结合荧光增强，凭借卓越的细胞滞留性、超高灵敏度及独特的免丙磺舒特性，使其成为细胞钙检测的理想工具。
Screen Quest™ Calbryte-590™免丙磺舒免洗钙检测试剂盒具有以下特性，
1.针对脆弱或难转染细胞系的GPCR及钙通道监测进行了全面优化：
2.相较于绿色荧光钙检测方法，其红色荧光特性可有效规避化合物库中有色物质的干扰；同时兼容GFP标记细胞系，满足高内涵分析需求。
3.支持96孔或384孔板规格的自动化操作
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 540 nm |
| Em： | 590 nm |
| Cutoff： | 570 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底部读取/分液处理 |
| 其他可用仪器 | |
| ArrayScan, FDSS, FlexStation, IN Cell Analyzer, NOVOStar, ViewLux |
样品实验方案
简要概述
1.在生长培养基中准备细胞
2.添加Calbryte 590 AM染料加载溶液（96孔板：100 µL /孔；384孔板：25 µL /孔）
3.室温或37°C下孵育45-60分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光
溶液配制
储备溶液配制
1. Calbryte 590 AM储备溶液：
向Calbryte 590 AM（组分A）的小瓶中加入20 µL（#36200）或200 µL（#36201和＃36202）DMSO。
注意：20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装，并在<-20℃下保存。 避光，并避免重复冻融。
2.分析缓冲液（1X）
取9 mL的HHBS（组分C，试剂盒#36202中未包括）加入1 mL的10XPluronic®F127 Plus（10X）（组分B）充分混匀。
工作溶液配制
Calbryte 590 AM工作溶液
将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（1X）中，并充分混匀。
注意：1.该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。
2. 10 mL染料加载溶液科满足一块96孔板需求。
实验步骤
1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。
2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟，然后在室温下将板再孵育15-30分钟。
注意：如果测定需要37°C，请立即进行实验，而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作，则在室温下孵育细胞板1小时（建议孵育时间不超过2小时）。
3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。
4.通过Ex / Em = 540/590 nm检测荧光强度。
