Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
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产品优势
1.超高灵敏度：生物发光原理，信噪比优于荧光检测法
2. 特异性强：可实现对特定细胞器钙信号的靶向检测
3.应用广泛：特别适用于GPCR受体和钙通道的功能研究
适用范围
用于钙离子检测
产品介绍
钙离子流检测作为药物研发中筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的首选方法，本试剂盒创新性地采用具有高钙离子敏感性和膜通透性的腔肠素类似物作为钙指示剂，适用于转染了水母发光蛋白（apoaequorin）基因的细胞。水母发光蛋白源自维多利亚多管发光水母（Aequorea victoria），是一种广泛应用于细胞内的钙敏感型生物发光蛋白，其与钙离子结合后会发射蓝光，且发光强度与Ca²⁺浓度呈直接正相关。
相较于传统荧光检测试剂盒（如Fluo-4、Fluo-3、Calcium-3和Calcium-4等），腔肠素的检测试剂盒具有显著更高的灵敏度。该试剂盒不仅为监测G蛋白偶联受体（GPCRs）和钙通道活性提供了优化方案，还能便捷地适配96孔或384孔微孔板检测形式并实现自动化操作。借助可定向表达于特定细胞器、细胞和组织中的重组水母发光蛋白技术，本产品能够实现对特定亚细胞区域内钙离子动态变化的精准监测。
适用仪器
| 发光酶标仪 | |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底部读取/分液处理 |
样品实验方案
简要概述
1.移除生长培养基
2.加入腔肠素装载溶液（96孔板：100 µL /孔，384孔板：25 µL /孔）
3.室温下孵育3-4小时
4.检测水母发光蛋白的发光强度
储备溶液配制
除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分装为单次使用量，配制后保存于-20°C。避免反复冻融。
腔肠素类似物
将250 µL无水乙醇（组分B）加入腔肠素类似物（组分A）小瓶中，充分混匀。
注意：25 µL复溶的腔肠素类似物可满足一块板的需求。未使用的腔肠素类似物储备液若密封避光保存于<-20°C，可稳定存放超过一个月。需避免反复冻融。
检测缓冲液（1X）
a）对于＃36305（10板试剂盒），直接使用即用型1X检测缓冲液（组分C）
b）对于 ＃36306（100板试剂盒），将10 mL 10X检测缓冲液（组分C）与90 mL HHBS缓冲液（试剂盒未提供）混合，充分混匀。
注意：10 mL 1X检测缓冲液可满足一块板的需求。未使用的1X检测缓冲液需保存于4°C。
工作溶液配制
腔肠素加载溶液
将25 µL无水乙醇复溶的腔肠素类似物（参见储备溶液配制）加入10 mL 1X检测缓冲液（参见储备溶液配制），充分混匀
注意：该工作液避光条件下室温至少可稳定2小时。
细胞样本制备指南请访问：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
实验步骤
1.移除细胞板中的生长培养基。
注意：为减少血清或培养基对化合物的干扰，此步骤非常关键。
替代方案：使用含0.5-1% FBS的生长培养基培养细胞，可省略移除步骤。此时需使用1X缓冲液配制的2X腔肠素加载溶液。
2.向细胞板中加入腔肠素加载溶液（96孔板：100 µL /孔；384孔板：25 µL /孔）。
3.将加载腔肠素的细胞板避光条件下室温孵育3-4小时。
4.用HHBS缓冲液或所需缓冲液配制化合物板。
5.使用配备光电倍增管的密闭光子检测系统监测水母素发光强度。仪器必须完全隔绝外部光线。
