蛋白酶体20S荧光底物Suc-LLVY-Aminoluciferin

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产品优势

灵敏度高

适用范围

用于20S蛋白酶体、钙蛋白酶及其他糜蛋白酶样蛋白酶的高灵敏度发光底物

产品介绍

Suc-LLVY-D-氨基荧光素是一种用于20S蛋白酶体、钙蛋白酶及其他糜蛋白酶样蛋白酶的高灵敏度发光底物。该非发光底物经蛋白酶催化水解后，可生成能通过荧光素酶反应产生强烈发光的D-氨基荧光素。此类氨基荧光素底物的检测灵敏度显著高于比色法和荧光法底物。

蛋白酶体最常见的形式是26S蛋白酶体，由1个20S核心颗粒结构和2个19S调节帽组成。所有20S颗粒均包含四个堆叠的七聚体环状结构，这些环状结构由两种不同类型的亚基构成：α亚基主要起结构作用，而β亚基则主要承担催化功能。堆叠结构的外侧两个环各由7个α亚基组成，作为调节颗粒的锚定位点，其N末端形成门控结构以阻止底物无序进入内核空腔；内侧两个环各由7个β亚基构成，其中包含执行蛋白水解反应的蛋白酶活性位点。

操作方法

以下说明书仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

1.在DMSO中制备5至10 mM的储备溶液。

2.准备2X蛋白酶体底物（20至50μM）测定溶液，如下所示：

25至50 L底物储备液（10 mM）

100升DTT（1M）

400 L EDTA（100 mM）

10mL Hepes Buffer（25mM），pH = 7.4

3.用2X荧光蛋白酶体底物测定溶液（来自步骤1）混合等体积的质体标准物或样品，并在室温下孵育溶液至少1小时。

4.监测荧光使用荧光酶标仪。