鬼笔环肽-AF488标记

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产品优势  

高特异性结合：选择性结合F-肌动蛋白（纤维状肌动蛋白），能清晰显示细胞骨架的精细结构。

低背景干扰 ：信噪比高，背景低，成像清晰。

 

适用样品类型

仅用于固定细胞。固定和透化细胞、细胞培养、无细胞实验、甲醛固定和透化组织切片

 

产品介绍

XFD488由AAT Bioquest公司生产，其化学结构与Alexa Fluor® 488完全相同（Alexa Fluor®为ThermoFisher公司注册商标）。XFD488鬼笔环肽标记在化学性质上等同于Alexa Fluor® 488鬼笔环肽。这种绿色荧光鬼笔环肽偶联物能够特异性结合F-肌动蛋白。

在纳摩尔浓度下使用时，鬼笔环肽衍生物可作为便捷的荧光探针，用于标记、识别和定量经甲醛固定及透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白。荧光鬼笔环肽衍生物是高分辨率研究肌动蛋白网络的重要工具。

AAT Bioquest提供多种不同荧光颜色的鬼笔环肽衍生物，适用于多色荧光成像实验。

 

注意事项

产品外观形态：液体（浓度1mg/ml）（注：鬼笔环肽系列产品有固体和液体两种，液体为DMSO溶解后的产品，则不需再溶解。）

样品分析方案

概述

1.将样本置于微孔板孔中

2.吸弃孔内液体

3.每孔加入100 μL鬼笔环肽- XFD 488标记液

4.室温避光孵育20–90分钟

5.清洗细胞去除未结合染料

6.使用FITC滤光片进行荧光显微镜观察

注意：将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。

 

储存条件

-20℃避光保存可稳定至少6个月，避免反复冻融

鬼笔环肽具毒性（半数致死量LD50=2 mg/kg），虽单管含量极低（仅对蚊虫可能致命），仍需谨慎操作

 

工作溶液配置

鬼笔环肽- XFD 488标记工作溶液

取1 µL鬼笔环肽- XFD 488标记原液加入1 mL含1% BSA的PBS缓冲液中混匀。

注意1. 鬼笔环肽标记原液需分装后-20℃避光保存

       2.不同细胞类型染色效果可能存在差异，建议根据实际情况调整工作液浓度

 

样本实验操作流程

细胞染色

1.使用3.0-4.0%甲醛PBS溶液室温固定细胞10-30分钟

注意：避免使用含甲醇固定剂，甲醇会破坏肌动蛋白结构。推荐使用无甲醇甲醛固定剂

2.PBS缓冲液洗涤固定后细胞2-3次

可选：为提高通透性，可加入0.1% Triton X-100 PBS溶液处理3-5分钟，之后用PBS洗涤2-3次

3.向96孔板每孔加入100 μL鬼笔环肽- XFD 488工作液，室温避光染色20-90分钟

4.用PBS轻柔洗涤2-3次去除多余标记物，封片后使用FITC滤光片组进行荧光显微镜观察