鬼笔环肽-AF488标记
Ex (nm) | 499 | Em (nm) | 520 |
分子量 | ~1300 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
高特异性结合:选择性结合F-肌动蛋白(纤维状肌动蛋白),能清晰显示细胞骨架的精细结构。
低背景干扰 :信噪比高,背景低,成像清晰。
适用样品类型
仅用于固定细胞。固定和透化细胞、细胞培养、无细胞实验、甲醛固定和透化组织切片
产品介绍
XFD488由AAT Bioquest公司生产,其化学结构与Alexa Fluor® 488完全相同(Alexa Fluor®为ThermoFisher公司注册商标)。XFD488鬼笔环肽标记在化学性质上等同于Alexa Fluor® 488鬼笔环肽。这种绿色荧光鬼笔环肽偶联物能够特异性结合F-肌动蛋白。
在纳摩尔浓度下使用时,鬼笔环肽衍生物可作为便捷的荧光探针,用于标记、识别和定量经甲醛固定及透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白。荧光鬼笔环肽衍生物是高分辨率研究肌动蛋白网络的重要工具。
AAT Bioquest提供多种不同荧光颜色的鬼笔环肽衍生物,适用于多色荧光成像实验。
注意事项
产品外观形态:液体(浓度1mg/ml)(注:鬼笔环肽系列产品有固体和液体两种,液体为DMSO溶解后的产品,则不需再溶解。)
样品分析方案
概述
1.将样本置于微孔板孔中
2.吸弃孔内液体
3.每孔加入100 μL鬼笔环肽- XFD 488标记液
4.室温避光孵育20–90分钟
5.清洗细胞去除未结合染料
6.使用FITC滤光片进行荧光显微镜观察
注意:将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。
储存条件
-20℃避光保存可稳定至少6个月,避免反复冻融
鬼笔环肽具毒性(半数致死量LD50=2 mg/kg),虽单管含量极低(仅对蚊虫可能致命),仍需谨慎操作
工作溶液配置
鬼笔环肽- XFD 488标记工作溶液
取1 µL鬼笔环肽- XFD 488标记原液加入1 mL含1% BSA的PBS缓冲液中混匀。
注意1. 鬼笔环肽标记原液需分装后-20℃避光保存
2.不同细胞类型染色效果可能存在差异,建议根据实际情况调整工作液浓度
样本实验操作流程
细胞染色
1.使用3.0-4.0%甲醛PBS溶液室温固定细胞10-30分钟
注意:避免使用含甲醇固定剂,甲醇会破坏肌动蛋白结构。推荐使用无甲醇甲醛固定剂
2.PBS缓冲液洗涤固定后细胞2-3次
可选:为提高通透性,可加入0.1% Triton X-100 PBS溶液处理3-5分钟,之后用PBS洗涤2-3次
3.向96孔板每孔加入100 μL鬼笔环肽- XFD 488工作液,室温避光染色20-90分钟
4.用PBS轻柔洗涤2-3次去除多余标记物,封片后使用FITC滤光片组进行荧光显微镜观察