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7-AAD(7-氨基放线菌素D)CAS 7240-37-1

英文名称:7-AAD [7-Aminoactinomycin D] *CAS 7240-37-1*
产品参数
Ex (nm)549Em (nm)648
分子量1270.43溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

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产品优势

7-AAD(7-氨基放线菌素D)是一种细胞非渗透性、G-C选择性DNA嵌入染料,具有红色荧光特性,可特异性染色死亡及坏死细胞,适用于流式细胞术和显微镜检测中的细胞活力评估。

G-C选择性DNA嵌入特性:对富含GC区域具有高亲和力,呈红色荧光(激发/发射波长 = 549/648 nm)

细胞非渗透性染料:特异性染色膜结构受损的死亡及坏死细胞

488 nm兼容性:大斯托克斯位移有效减少多色流式中与FITC和PE的光谱重叠

低于PI的量子产率:量子产率0.02提供可控荧光强度,实现灵敏检测

 

适用范围

用于标记死细胞与固定细胞

 

产品介绍

7-AAD(7-氨基放线菌素D)是一种细胞非渗透性、具有G-C碱基偏好的DNA染料,其激发峰位于549 nm,发射峰位于648 nm。

作为双链DNA的嵌入型染料,7-AAD对G-C富集区具有显著结合偏好性,这与DAPI(偏好A-T区)及碘化丙啶(无序列特异性)等其他DNA染料形成鲜明对比。由于无法穿透细胞膜,7-AAD不能像可透膜的Hoechst 33342或吖啶橙那样用于活细胞染色,因此主要应用于质膜受损的细胞标记,包括固定细胞、坏死细胞及其他非活性细胞,在流式细胞术中作为细胞活力指示染料。

7-AAD在流式细胞术中应用广泛,尤其适用于细胞周期测定、细胞分选及细胞凋亡研究。在凋亡检测中,常与膜联蛋白V偶联物(如Annexin V FITC)联合使用:膜联蛋白V通过结合外翻的磷脂酰丝氨酸识别早期凋亡细胞,而7-AAD则标记膜结构损坏的坏死细胞。

相较于碘化丙啶(PI),7-AAD具有以下特性:两者均为膜非渗透性染料,可染色非活性或固定细胞,且均可被488 nm氩离子激光激发。区别在于PI的量子产率(0.2)显著高于7-AAD(0.02),因此平均荧光信号更强;而7-AAD具有更大的斯托克斯位移,在多色分析中能减少光谱重叠,使其与FITC、藻红蛋白等常用荧光染料更具兼容性。

从光谱特性来看,7-AAD分子量为1270.43道尔顿,激发波长549 nm,发射波长648 nm,可被488 nm激光有效激发,适用于PE/Cy5或FL3通道的流式细胞仪检测。

染色溶液配制方法:可使用DMSO配制1-10 mM的7-AAD储存液,于-20°C以下避光保存时有效期可达6个月。

 

注意事项

不能用于活细胞染色

实验方案

染色细胞分析方案

染色工作液配制

使用DMSO溶解7-AAD,配制1-10 mM储存液

注意:-20℃以下避光储存,有效期6个月

 

7-AAD染色操作流程(精简版)

1.配制1-10 mM 7-AAD储存液(DMSO溶解)

2.细胞固定处理

3.离心收集细胞并重悬

4.加入0.5-5 μM 7-AAD工作液

5.避光孵育15-60分钟

6.检测荧光强度(EX/EM = 545/650 nm,FL3通道)

 

试剂应用文献

Exploring a Flow Cytometry-Based CFU Assay for Functional Assessment of Human HSPCs: a Robust Alternative to Morphological Colony Evaluation

Authors: Revenfeld, Anne Louise S and M{\o}ller, Ana{\"\i}s MJ and Tylvad, Mette and Bill, Marie and Rosenberg, Carina A and M{\o}ller, Bjarne K
Journal: Stem Cell Reviews and Reports (2025): 1--16