7-AAD（7-氨基放线菌素D）CAS 7240-37-1

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适用范围

用于标记死细胞与固定细胞

产品介绍

7-AAD是一种细胞非渗透性DNA染料，对G-C碱基对具有特异性亲和力，其激发峰和发射峰分别位于549 nm和648 nm。

7-AAD是一种能够嵌入双链DNA（dsDNA）的荧光染料。与其他DNA染料（如偏好A-T碱基对的DAPI和无碱基特异性的碘化丙锭）不同，7-AAD对G-C富集区具有强结合偏好。由于7-AAD无法穿透细胞膜，因此不能用于活细胞染色（这与膜渗透性的Hoechst 33342和吖啶橙不同）。该染料主要用于标记细胞膜受损的细胞（如固定细胞、坏死细胞或其他失活细胞），是流式细胞术中常用的细胞活性检测染料。

7-AAD最常用于流式细胞术分析，包括：细胞周期检测、细胞分选和细胞凋亡研究。在凋亡研究中，7-AAD常与Annexin V偶联物（如Annexin V-FITC）配合使用——Annexin V通过结合外翻的磷脂酰丝氨酸识别早期凋亡细胞，而7-AAD则用于标记细胞膜破损的坏死细胞。

7-AAD常作为碘化丙锭（PI）的替代染料，二者均具有细胞膜非渗透性，专用于死细胞或固定细胞的染色，且均可被488 nm氩离子激光激发。两者的主要差异在于：PI的量子产率（0.2）显著高于7-AAD（0.02），因此平均荧光信号更强；而7-AAD则具有更大的斯托克斯位移（约100 nm），能有效降低多色分析中的光谱重叠，使其与FITC、藻红蛋白（PE）等常用荧光染料的兼容性更合适。这种特性使7-AAD特别适合需要多色标记的复杂实验体系。

染色细胞分析方案

染色工作液配制

使用DMSO溶解7-AAD，配制1-10 mM储存液

注意：-20℃以下避光储存，有效期6个月

7-AAD染色操作流程（精简版）

1.配制1-10 mM 7-AAD储存液（DMSO溶解）

2.细胞固定处理

3.离心收集细胞并重悬

4.加入0.5-5 μM 7-AAD工作液

5.避光孵育15-60分钟

6.检测荧光强度（EX/EM = 545/650 nm，FL3通道）