吖啶橙 CAS 65-61-2
| Ex (nm) | 490 | Em (nm) | 520 |
| 分子量 | 301.82 | 溶剂 | Water |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
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产品优势
吖啶橙是一种可穿透细胞膜的核酸荧光染料,能对核酸进行差异染色——与双链DNA结合时发射绿色荧光,与RNA或单链DNA结合时发射红色荧光,从而实现对活细胞或固定细胞中不同核酸类型的同步可视化观察。
差异核酸染色特性:通过嵌入作用与双链DNA结合产生绿色荧光(激发/发射:490/520 nm),与RNA或单链DNA结合产生红色荧光(激发/发射:460/640 nm)
细胞透性异染染料:在酸性环境中可累积于溶酶体等酸性区室
弱碱性特征:中性电荷特性利于细胞膜渗透,适用于活细胞成像
双色细胞活力检测:可与碘化丙啶联用,同步区分活细胞与死细胞
产品介绍
吖啶橙是一种可穿透细胞膜的核酸染料,与双链DNA结合时显示绿色荧光,与RNA或单链DNA结合时显示红色荧光。
该染料最初作为快速标记和鉴定细菌的方法被开发,现已成为成熟的核酸荧光染色剂。其化学结构呈中性电荷且具弱碱性,易于跨细胞膜扩散,因此可用于活细胞染色。进入细胞质后,染料倾向于在酸性细胞区室(如溶酶体)中积累并滞留,故常被用作溶酶体特异性染色剂。
核酸染色机制
根据其弱碱性特性,吖啶橙可与酸性的双链DNA、单链DNA及RNA结合。与双链DNA的结合主要通过嵌入作用实现,此时染料在核酸周围浓度较低,产生激发峰490 nm/发射峰520 nm的绿色荧光;而与RNA的结合则依靠静电作用,导致染料局部浓度较高,产生激发峰460 nm/发射峰640 nm的红色荧光。
吖啶橙与碘化丙啶联用
吖啶橙常与碘化丙啶联合用于细胞活力检测。由于吖啶橙可穿透细胞膜,能同时标记活细胞和死细胞;而碘化丙啶无法穿透完整细胞膜,仅标记死细胞。两者结合可实现活细胞与死细胞的定量分析。
壬基吖啶橙衍生物
壬基吖啶橙是吖啶橙的衍生物,可特异性在线粒体内积累,常用于线粒体相关研究。
染色细胞示例
以下程序适用于大多数细胞类型。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型的存在和其他因素可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的真实或明显染色,导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。
1)制备1-10mM DMSO储备溶液。如果储存在-20°C,DMSO储备液可以保存6个月。
2)使用适合您样品的固定方案。
3)通过离心沉淀细胞,并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中,在pH 7.4下进行佳染料染色。培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。
4)使用1和10μM之间的浓度添加AO染色并孵育15至60分钟作为指导。
注意:在开始的实验中,好在整个建议的范围内尝试几种染料浓度,以确定产生佳染色的浓度。





