吖啶橙*10 mg/mL水溶液*

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适用范围

用于细胞周期测定

产品介绍

吖啶橙是一种核酸选择性荧光阳离子染料，可用于细胞周期测定。该染料具有细胞膜穿透性，通过嵌入作用或静电吸引与DNA和RNA发生相互作用。

当其与DNA结合时，光谱特性与荧光素非常相似，激发峰位于502 nm，发射峰位于525 nm（绿色荧光）；

而与RNA结合时，激发峰移至460 nm（蓝光），发射峰移至650 nm（红色荧光）。该染料常用于落射荧光显微镜检测。

常用储备溶液配制

表1. 不同质量吖啶橙配制*10 mg/mL水溶液*至目标浓度所需纯水体积对照表。

注：本体积仅用于配制储备溶液，具体实验/生理缓冲液选择请参考实验方案示例。

以下程序适用于大多数细胞类型。生长培养基，细胞密度，其他细胞类型的存在和其他因素可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的真实或明显染色，导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

1）制备1-10mM DMSO储备溶液。如果储存在-20°C，DMSO储备液可以保存6个月。

2）使用适合您样品的固定方案。

3）通过离心沉淀细胞，并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中，在pH 7.4下进行佳染料染色。培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。

4）使用1和10μM之间的浓度添加AO染色并孵育15至60分钟作为指导。

注意：在初的实验中，好在整个建议的范围内尝试几种染料浓度，以确定产生佳染色的浓度。