Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒
Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
可实现痕量次氯酸的精准测定
适用范围
用于次氯酸检测
产品介绍
次氯酸根阴离子(ClO⁻)及其质子化形式次氯酸(HClO)是生物系统中重要的活性氧物种(ROS)。次氯酸(次氯酸盐)的过量产生会导致组织损伤,并引发关节炎、肾功能衰竭和癌症等疾病。此外,次氯酸钠(NaClO)作为漂白剂已广泛应用于日常生活中的表面清洁、除臭和水体消毒。过量接触次氯酸钠可能导致中毒,症状包括严重呼吸困难、胃部刺激、皮肤及眼部红肿疼痛。因此,高选择性和高灵敏度的次氯酸(次氯酸盐)检测具有重要的毒理学和环境监测意义。
Amplite®比色法次氯酸(次氯酸盐)检测试剂盒提供了一种基于吸光度检测的高灵敏度、高特异性分析方法。该检测体系采用无色的Oxirite™次氯酸特异性传感分子,当其与次氯酸/次氯酸盐发生选择性反应后,可生成具有显著显色特性的产物,通过酶标仪在580nm波长处进行吸光度检测即可实现痕量次氯酸的精准测定。
适用仪器
光吸收酶标仪 | |
吸收: | 555 ± 5nm |
推荐孔板: | 透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备次氯酸盐工作溶液(50 µL)
2.添加次氯酸盐标准液或测试样品(50 µL)
3.在室温下孵育3-5分钟
4.监测吸光度在555±5 nm处的增加
溶液配制
1.储存溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液(20X):
将500 µL DMSO(组分D)添加到Oxirite 次氯酸盐传感器(组分A)的小瓶中,制成20X Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液。
2.标准溶液配制
次氯酸盐标准
将100μL次氯酸盐标准品(组分C)添加到400μL分析缓冲液(组分B)中,得到1%次氯酸盐标准溶液(H7)。 取1%次氯酸盐标准溶液(H7),并在测定缓冲液(组分B)中进行1:3系列稀释,得到系列稀释的次氯酸盐标准溶液(H6-H1)。
3.工作溶液配制
将250 µL 20X Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成次氯酸盐工作溶液。
注意:这种次氯酸盐工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定,请及时使用。 避光。
样品操作及实验分析
表1.在96孔透明底部微孔板中的次氯酸盐标准品和测试样品的布局。 H =次氯酸盐标准品(H1-H7,0.001%至1%),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
H1 | H1 | ... | ... |
H2 | H2 | ... | ... |
H3 | H3 | ||
H4 | H4 | ||
H5 | H5 | ||
H6 | H6 | ||
H7 | H7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
H1-H7 | 50ul | 连续稀释(0.001%至1%) |
BL | 50ul | 分析缓冲液(组分B) |
TS | 50ul | 测试样品 |
1.如表1和表2所示,在96孔透明底部微孔板上制备次氯酸盐标准液(H),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂 而不是50 µL。
2.将50 µL次氯酸盐工作溶液添加到次氯酸盐标准液,空白对照和测试样品的每个孔中,以使次氯酸盐总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板,请向每个孔中添加25 µL工作溶液,总体积为50 µL /孔。
3.在避光条件下,室温下孵育反应3-5分钟。
4.使用吸光度板读数器在OD = 555±5 nm处监控吸光度的增加。