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Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光

英文名称:Amplite® Fluorimetric Fluorescamine Protein Quantitation Kit *Blue Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量278.26溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

几乎不会发生空气氧化,灵敏度高、稳定性好

 

适用范围

用于荧光胺蛋白质定量

 

产品介绍

荧光胺(Fluorescamine)本身无荧光特性,但能与肽类和蛋白质中的伯脂胺快速反应,生成蓝绿色荧光衍生物。基于此原理,Amplite®荧光胺蛋白质检测试剂盒开发了一种简便的溶液蛋白质浓度定量方法。

Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒支持96孔或384孔微孔板检测,无需分离步骤即可适配自动化系统,30分钟内即可完成检测,最低可检测至3μg/mL的牛血清白蛋白(BSA)浓度。其便捷的操作流程和高灵敏度特性,使其成为蛋白质定量分析的理想选择。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 380
Em: 470
Cutoff: 420
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备荧光胺工作溶液(25μL)
2.添加BSA标准品或测试样品(75μL)
3.在室温下孵育5-30分钟
4.在Ex / Em = 380 / 470nm处读取荧光强度

 

溶液制备 

1.1标准溶液

BSA标准
通过进行1:2连续稀释,将适量的BSA标准品1 mg / mL(组分C)稀释到PBS中,以获得BSA标准品(BS7-BS1)的连续稀释液。

 

2.工作溶液

将DMSO(组分B)的全部内容物加入荧光胺(组分A)的瓶中,并充分混合。

注意:2.5 mL的荧光胺工作溶液足以用于1个平板。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中BSA标准品和测试样品的布局。 BS = BSA标准品(BS1-BS7,1.563至100μg/ mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
BS1 BS1 ... ...
BS2 BS2 ... ...
BS3 BS3    
BS4 BS4    
BS5 BS5    
BS6 BS6    
BS7 BS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
BS1-BS7 75ul 连续稀释(1.563至100微克/毫升)
BL 75ul PBS
TS 75ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备BSA标准品(BS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用30μL试剂代替75μL。

2.向BSA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入25μL荧光胺工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入10μL荧光胺工作溶液,总体积为40μL/孔。

3.在室温下孵育反应5至30分钟,避光。

4.用Ex / Em = 380 / 470nm的荧光板读数器监测荧光增加。