Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒

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产品优势

在100μL反应体系中可检测低至0.4μM的次氯酸浓度。

适用范围

用于次氯酸检测

产品介绍

次氯酸根阴离子（ClO⁻）及其质子化形式次氯酸（HClO）是生物系统中重要的活性氧物种（ROS）。次氯酸（次氯酸盐）的过量产生会导致组织损伤，并引发关节炎、肾功能衰竭和癌症等疾病。此外，次氯酸钠（NaClO）作为漂白剂已广泛应用于日常生活中的表面清洁、除臭和水体消毒。过量接触次氯酸钠可能导致中毒，症状包括严重呼吸困难、胃部刺激、皮肤及眼部红肿疼痛。因此，高选择性和高灵敏度的次氯酸（次氯酸盐）检测具有重要的毒理学和环境监测意义。

Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒提供了一种高特异性的荧光检测方案。其核心检测原理是：弱荧光性的Oxirite™次氯酸传感分子与次氯酸（次氯酸盐）发生特异性反应后，可生成强荧光产物，荧光信号增强超过100倍，可通过荧光酶标仪进行检测。该试剂盒在100μL反应体系中可检测低至0.4μM的次氯酸浓度。

适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.准备次氯酸盐工作溶液（50 µL）
2.添加次氯酸盐标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光强度

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液（200X）：
将50 µL DMSO（组分D）添加到Oxirite 次氯酸盐传感器（组分A）的小瓶中，制成200X储备溶液。 避光。

2.标准溶液配制

次氯酸盐标准
将50 µL次氯酸盐标准溶液（组分C）添加到450 µL测定缓冲液（组分B）中，得到100 mM次氯酸盐标准溶液（H7）。 取100 mM（H7）次氯酸盐标准溶液，并在测定缓冲液（组分B）中进行1:10系列稀释，以得到10、1、0.1和0.01 mM系列次氯酸盐标准品（H6-H3）。 然后，使用0.01 mM次氯酸盐标准品（H3），并在测定缓冲液（组分B）中进行1：3的比例，以得到0.003和0.001 mM的次氯酸盐标准品稀释液（H2-H1）。

3.工作溶液配制

将25 µL 200X Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成次氯酸盐工作溶液。

注意：这种次氯酸盐工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

样品操作及实验分析

表1. 96孔黑色实心微孔板中次氯酸盐标准品和测试样品的布局。 H =次氯酸盐标准品（H1-H7，0.001至100 mM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局，准备次氯酸盐标准品（H），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL次氯酸盐工作溶液添加到次氯酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使次氯酸盐总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL次氯酸盐工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处监视荧光的增加。