Amplite 发光法过氧化酶检测试剂盒

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产品优势  

"混合即读"型操作，适用于高通量筛选（HTS）液体处理仪器。

适用范围

用于过氧化物酶检测

产品介绍

过氧化物酶是一种小分子（分子量约40 KD），通常可以以4:1的比例与抗体偶联。由于其分子量较小，很少会对抗体/抗原复合物的形成造成空间位阻问题。与其他标记酶相比，过氧化物酶的成本较低。其主要缺点是对许多防腐剂（如叠氮化钠）的耐受性较差，即使低浓度的叠氮化钠也会使过氧化物酶失活。HRP偶联物广泛用作ELISA、免疫组织化学技术以及Northern、Southern和Western blot分析中的二级检测试剂。

我们提供的快速（10分钟）HRP检测试剂盒，采用一步式、均相、免洗的检测系统。该试剂盒可用于ELISA、酶反应动力学表征以及氧化酶抑制剂的高通量筛选等。试剂盒提供了优化的"混合即读"检测方案，兼容高通量液体处理仪器。

适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.准备HRP工作溶液（50μL）
2.添加HRP标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育30分钟至2小时
4.监测发光强度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融。
1.1 HRP原液（20 U / mL）：
将1mL含有0.1％BSA的PBS加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

2.标准溶液

HRP标准
在1999μL含0.1％BSA的PBS中加入1μL20U / mL HRP储备液，得到10 mU / mL HRP标准溶液（PS7）。 然后使用10 mU / mL标准溶液并进行1：2连续稀释以获得剩余的连续稀释的标准品（PS6-PS1）。

3.工作溶液

将30μL3％稳定的H₂O₂溶液（组分B）加入5mL分析缓冲液（组分A）中以制备HRP工作溶液并避光。 注意：HRP工作溶液在室温下稳定至少8小时，如果避光，不会造成活性损失。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 PS =过氧化物酶标准品（PS1-PS7,0.156至10mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品（PS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLHRP工作溶液，使总HRP测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLHRP工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30分钟至2小时，避光。

4.使用标准光度计监测发光强度。