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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光适用于流式细胞仪

英文名称:Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*
产品参数
Ex (nm)498Em (nm)517
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

灵敏度高

 

适用范围

用于活细胞内的过氧化氢检测

 

产品介绍

过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,作为多种氧化应激相关状态的关键调控因子,参与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、多种神经退行性疾病及唐氏综合征等众多生物事件。测量该活性氧物种有助于确定氧化应激如何调控各类细胞内通路。

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒采用独特的OxiVision™ Green过氧化物探针定量活细胞中的过氧化氢。该探针具有细胞膜渗透性,与过氧化氢反应时可产生绿色荧光。本试剂盒为监测活细胞中过氧化氢水平提供了灵敏工具,并经过优化适用于流式细胞术分析。

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488nm 滤波片
Em: 530/30nm 滤波片
推荐通道: FITC通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.用OxiVision Green过氧化物探针染色细胞

3.用测试化合物处理细胞

4.通过流式细胞仪FITC通道(激发/发射=490/530 nm)监测荧光强度

 

储备溶液制备 

除非特别说明,所有未使用的母液应分装为单次用量,配制后保存于-20°C,避免反复冻融。

OxiVision™ Green过氧化物储备溶液:

向OxiVision™ Green过氧化物传感器(组分A)的小瓶中加入100 µL DMSO(组分B),充分混匀。

注:1 µL重溶的储备溶液可满足0.5 mL细胞检测。储备溶液需避光保存并尽快使用。

 

细胞样本制备指南

详见:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

 

标准实验流程

1.用含OxiVision™Green储备液的完全培养基或自选缓冲液,37°C避光孵育20-30分钟

2.处理组:用含测试化合物的完全培养基或自选缓冲液,37°C孵育所需时间。对照组(未处理细胞):加入等量化合物缓冲液。

注:推荐使用完全培养基处理。若测试化合物对血清敏感,可先吸除生长培养基和血清成分,改用1×HHBS缓冲液(含20 mM Hepes)或自选缓冲液重悬细胞,亦可使用无血清培养基。
示例:我们使用100 µM过氧化氢的完全培养基处理Jurkat细胞,37°C诱导90分钟(详见图1)。

3.通过流式细胞仪FITC通道(Ex/Em=490/530 nm)检测荧光强度。

 

试剂应用文献

Ultrasound-Triggered Azo Free Radicals for Cervical Cancer Immunotherapy
Authors: Wang, Yumeng and Lv, Bin and Wang, Han and Ren, Tingting and Jiang, Qian and Qu, Xinyu and Ni, Dalong and Qiu, Junjun and Hua, Keqin
Journal: ACS nano (2024)
 
Hyaluronan-decorated copper-doxorubicin-anlotinib nanoconjugate for targeted synergistic chemo/chemodynamic/antiangiogenic tritherapy against hepatocellular carcinoma
Authors: Tan, Gang and Hou, Guanghui and Qian, Junmin and Wang, Yaping and Xu, Weijun and Luo, Wenjuan and Chen, Xiaobing and Suo, Aili
Journal: Journal of Colloid and Interface Science (2024)