Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒

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产品优势

1.高特异性：可选择性结合NADH/NADPH并产生强荧光信号

2.灵敏检测：荧光强度与NAD(P)H浓度呈线性相关

3.操作便捷：探针可快速加载至活细胞内

4.兼容性强：信号可直接通过流式细胞仪PE通道检测

适用范围

用于细胞内NADH/NADPH检测

产品介绍

细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)及其磷酸酯(NADPH)的检测对疾病诊断和药物研发至关重要。NAD/NADH和NADP/NADPH这两对氧化还原辅酶在能量代谢、糖酵解、三羧酸循环和线粒体呼吸等过程中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平升高与活性氧(ROS)异常产生及DNA损伤密切相关。然而，由于缺乏高灵敏度的NAD(P)H探针，活细胞内NAD(P)H的动态监测一直面临技术瓶颈

Cell Meter™细胞内NADH/NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种高效监测活细胞内NAD(P)H水平的方法，其核心组分JZL1707 NAD(P)H是一种性能优异的荧光探针，能够特异性结合NADH/NADPH并产生高灵敏度荧光信号，该探针可轻松加载至活细胞内，且其荧光信号可直接通过流式细胞仪的PE检测通道进行便捷检测。

实验示例

概述

1.准备细胞（0.5-1×10⁶细胞/ mL）

2.37℃孵育细胞与测试化合物及JZL1707 NAD(P)H 30-60分钟

3.洗涤细胞后重悬于检测缓冲液

4.使用流式细胞仪PE通道进行分析

操作步骤

1.样品制备：取在0.5 mL无血清培养基或自选缓冲液，调整细胞密度至1×10⁵-1×10⁶个细胞/mL

注意：应单独评估每个细胞系，以确定佳细胞密度。贴壁细胞需用0.5 mM EDTA轻柔消化后，用无血清培养基洗涤一次

          JZL1707 NAD（P）H对血清敏感，因此建议将细胞保存在您选择的无血清培养基或缓冲液中。或者，可以制备细胞并在完全培养基中处理。与JZL1707 NAD（P）H Sensor孵育前，请更改为无血清培养基或您选择的缓冲液。

2.在37ºC下将细胞与测试化合物一起孵育所需的时间，以刺激细胞内的NADH / NADPH。

注意：孵育时间根据细胞类型和化合物特性优化。

3.每0.5 mL细胞悬液加入1 μL JZL1707 NAD(P)H（组分A），37ºC避光孵育30-60分钟

注意：NADH / NADPH阳性对照处理：将Jurkat细胞与100 µM NADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟，然后与JZL1707 NAD（P）H Sensor工作溶液在37ºC共同孵育30分钟。

4.用所需的缓冲液洗涤细胞一次。重悬于检测缓冲液（组分B）

5.使用流式细胞仪PE通道进行分析。设门分析目标细胞群，排除碎片干扰