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细胞膜荧光探针DiR,碘化物 CAS 100068-60-8

英文名称:DiR iodide [1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyanine iodide]
产品参数
Ex (nm)754Em (nm)778
分子量1013.39溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

现货

 

产品优势  

DiR是一种疏水性荧光染料,可特异性标记细胞膜及其他疏水性结构

 

适用范围

用于标记细胞膜

 

产品介绍

DiR染料是一类近红外(NIR)荧光探针,专为活细胞质膜标记设计,适用于共聚焦显微镜成像和小动物活体研究等应用领域。该染料通过结合两条C18烃链实现稳定的膜锚定作用,其特有的三碳菁骨架结构发射波长约775-785 nm的近红外荧光,可显著降低背景自发荧光,同时提高形态学成像的保真度。

近红外激发能量低于可见光波长,这一特性有效减少了光漂白现象和细胞应激反应。具有延长烃链结构的碳菁类似物能在细胞膜上存留数小时至数天,使得无需重复染色的长时间延时实验成为可能。DiR的发射光谱范围避免了与标准GFP/RFP通道的重叠,在与荧光细胞周期报告系统联用时,可实现多参数实验。

研究表明,在结肠上皮等器官的近红外成像中,DiR染料展现出更强的组织穿透力和更低的散射特性(Okada,2013),从而为类器官或胚胎系统提供了更清晰的三维可视化效果。DiR染料集稳定的双分子层结合能力、较低的光毒性以及与可见光荧光染料最小的光谱干扰等优势于一身,使其成为精细或复杂组织研究中长时间、低背景标记的理想解决方案。该染料兼容配备近红外通道的现代成像系统,不仅能获得更好的组织穿透效果,还能最大限度地减少光谱冲突。

 

Di系列染料 特点 选择建议
DiO染料(绿色) 活细胞或固定细胞、组织的的长期示踪剂。荧光强度低于DiI。对某些固定组织的染色效果一般。 DiI, DiO, DiD 和 DiR均可染色活细胞或固定细胞及组织(请您根据您的需求选择相应的探针),DiI比DiO荧光更亮;DiD,DiR波长更长,更适合组织染色;
DiA染料(绿色) 一种细胞膜绿色荧光染料,它在细胞膜中的扩散速度比 DiO 快,并且经常和 DiI 一起使用于细胞膜双色标记。可以进行染色后的固定。DiA 对固定细胞的染色效果比 DiO 好。
DiI染料(橙色) 活细胞或固定细胞、组织的的长期示踪剂。除标记细胞膜外,还可以检测细胞的融合和粘附、细胞迁移等。
DiB染料(橘色) 一种检测细胞膜电位的亲脂性阴离子荧光染料,它本身无荧光,当进人细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光。当它进入细胞后,指示细胞内荧光强度增加,即膜电位增加表示细胞去极化;反之,若细胞内荧光强度降低,即膜电位降低表示细胞超极化。
DiD染料(红色) 染色效率高,均一,不易猝灭,细胞毒性低,背景干扰小。
DiS染料(红色) 一种细胞膜红色荧光染料,它在细胞膜中的扩散速度比 DiD快,可以进行染色后的固定。DiS 对固定细胞的染色效果比 DiD好。
DiR染料(深红色) 常用于标记细胞膜,红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。DiR可以进行染色后的固定。

 

实验方案

细胞膜荧光探针(DiO/DiI/DiD/DiS/DiR)标记操作流程

DiO,DiI,DiD,DiS或DiR膜染色溶液:

DMSO或EtOH储备液

使用DMSO或乙醇配制1-5 mM储备液

注意:未使用的母液需-20℃避光保存,避免反复冻融

 

工作溶液:

用无血清培养基、HBSS或PBS稀释储备液,配制1-5 μM工作液

注意:合适的工作浓度需根据细胞类型优化,建议测试至少10倍浓度梯度

 

悬浮细胞

1. 将细胞以1×10⁶/mL的密度悬浮于染料工作液中

2. 37℃孵育2-20分钟(不同细胞类型需优化时间,建议从20分钟开始测试)

3. 1000-1500 rpm离心5分钟

4.取出上清液,将细胞重新悬浮在预热(37°C)的生长培养基中

5.重复洗涤2次(步骤同3-4)

 

 贴壁细胞

1.在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。

2.从生长培养基中取出盖玻片,轻轻地沥出多余的培养基。 将盖玻片放在湿度箱中。

3.加入100 μL染料工作液,轻摇使液体覆盖全部细胞

4. 37°C孵育2-20分钟。 (不同细胞类型需优化时间,建议从20分钟开始测试)

5.排出染料工作溶液,用生长培养基清洗盖玻片2-3次。(每次加入培养基后孵育5-10分钟)

 

4.显微镜检测:

1.说明书中的表1总结了DiD,DiO,DiI,DiS和DiR滤波器组的选择。

2.为了同时检测多种染料,可提供如下多波段滤波器组:

a)DiI和DiO = Omega XF52,Chroma 51004

b)DiI和DiD = Omega XF92,Chroma 51007

c)DiI,DiO和DiD = Omega XF93,Chroma 61005

 

5.流式细胞仪检测:

各染料对应检测通道:

DiO→FL1 | DiI→FL2 | DiD→FL3 | DiS/DiR→FL4

 

试剂应用文献

Taxus chinensis-Derived Nanovesicles Alleviate Mouse Colitis by Inhibiting Inflammatory Cytokines and Restoring Gut Microbiota
Authors: Gong, Qianyuan and Hu, Junqing and Pu, Chunlan and Zhao, Zihao and Guo, Yuanbiao
Journal: Journal of Inflammation Research (2025): 5611--5625
 
A “CPApoptosis” nano-actuator switches immune-off solid tumors to immune-on for fueling T-cell-based immunotherapy
Authors: Luo, Ying and Wang, Yi and Liu, Bo and Liu, Yun and Zhang, Wenli and Chen, Sijin and Rong, Xiyue and Xu, Lian and Du, Qianying and Liu, Jia and others,
Journal: Theranostics (2025): 3797
 
Nonshrinkable Thermosensitive Hydrogels Combined with Bispecific Anti-PSMA/CD3 T-Cell Engager for Effective Against Tumors in Mice Model
Authors: Wei, Pu-Sheng and Chou, Po-Yu and Hsu, Hao-Yi and Chen, Michael and Chen, Yi-Jou and Tsai, Tung-Han and Wen, Bang-Yu and Sheu, Ming-Thau and Chuang, Kuo-Hsiang and Lin, Hong-Liang
Journal: International Journal of Nanomedicine (2025): 3083--3111
 
In Situ Dual-targeted Drug Delivery System for Alleviating Imaging and Pathological Damage in Septic Arthritis
Authors: Wang, Mengxian and Yu, Zeping and Li, Xinlong and Li, Junqiao and Li, Jianshu and Luo, Jun and Li, Jiyao and Xiong, Yan and Yang, Jiaojiao
Journal: Acta Biomaterialia (2025)
 
pH-Responsive Polyethylene Glycol Engagers for Enhanced Brain Delivery of PEGylated Nanomedicine to Treat Glioblastoma
Authors: Meng, Jun-Lun and Dong, Zi-Xuan and Chen, Yan-Ru and Lin, Meng-Hsuan and Liu, Yu-Ching and Roffler, Steve R and Lin, Wen-Wei and Chang, Chin-Yuan and Tzou, Shey-Cherng and Cheng, Tian-Lu and others,
Journal: ACS nano (2025)