细胞膜荧光探针DiR,碘化物 CAS 100068-60-8

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现货

产品优势  

DiR是一种疏水性荧光染料，可特异性标记细胞膜及其他疏水性结构

适用范围

用于标记细胞膜

产品介绍

DiR染料是一类近红外（NIR）荧光探针，专为活细胞质膜标记设计，适用于共聚焦显微镜成像和小动物活体研究等应用领域。该染料通过结合两条C18烃链实现稳定的膜锚定作用，其特有的三碳菁骨架结构发射波长约775-785 nm的近红外荧光，可显著降低背景自发荧光，同时提高形态学成像的保真度。

近红外激发能量低于可见光波长，这一特性有效减少了光漂白现象和细胞应激反应。具有延长烃链结构的碳菁类似物能在细胞膜上存留数小时至数天，使得无需重复染色的长时间延时实验成为可能。DiR的发射光谱范围避免了与标准GFP/RFP通道的重叠，在与荧光细胞周期报告系统联用时，可实现多参数实验。

研究表明，在结肠上皮等器官的近红外成像中，DiR染料展现出更强的组织穿透力和更低的散射特性（Okada，2013），从而为类器官或胚胎系统提供了更清晰的三维可视化效果。DiR染料集稳定的双分子层结合能力、较低的光毒性以及与可见光荧光染料最小的光谱干扰等优势于一身，使其成为精细或复杂组织研究中长时间、低背景标记的理想解决方案。该染料兼容配备近红外通道的现代成像系统，不仅能获得更好的组织穿透效果，还能最大限度地减少光谱冲突。

细胞膜荧光探针（DiO/DiI/DiD/DiS/DiR）标记操作流程

DiO，DiI，DiD，DiS或DiR膜染色溶液：

DMSO或EtOH储备液：

使用DMSO或乙醇配制1-5 mM储备液

注意：未使用的母液需-20℃避光保存，避免反复冻融

工作溶液：

用无血清培养基、HBSS或PBS稀释储备液，配制1-5 μM工作液

注意：合适的工作浓度需根据细胞类型优化，建议测试至少10倍浓度梯度

悬浮细胞

1. 将细胞以1×10⁶/mL的密度悬浮于染料工作液中

2. 37℃孵育2-20分钟（不同细胞类型需优化时间，建议从20分钟开始测试）

3. 1000-1500 rpm离心5分钟

4.取出上清液，将细胞重新悬浮在预热（37°C）的生长培养基中

5.重复洗涤2次（步骤同3-4）

 贴壁细胞

1.在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。

2.从生长培养基中取出盖玻片，轻轻地沥出多余的培养基。 将盖玻片放在湿度箱中。

3.加入100 μL染料工作液，轻摇使液体覆盖全部细胞

4. 37°C孵育2-20分钟。 （不同细胞类型需优化时间，建议从20分钟开始测试）

5.排出染料工作溶液，用生长培养基清洗盖玻片2-3次。（每次加入培养基后孵育5-10分钟）

4.显微镜检测：

1.说明书中的表1总结了DiD，DiO，DiI，DiS和DiR滤波器组的选择。

2.为了同时检测多种染料，可提供如下多波段滤波器组：

a）DiI和DiO = Omega XF52，Chroma 51004

b）DiI和DiD = Omega XF92，Chroma 51007

c）DiI，DiO和DiD = Omega XF93，Chroma 61005

5.流式细胞仪检测：

各染料对应检测通道：

DiO→FL1 | DiI→FL2 | DiD→FL3 | DiS/DiR→FL4

试剂应用文献