死细胞核染料 DiTO -3 相当于TO-TO 3
英文名称:DiTO™-3 [equivalent to TOTO®-3] *5 mM DMSO Solution*
产品参数
Ex (nm) | 642 | Em (nm) | 661 |
分子量 | 1354.85 | 溶剂 | Water |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品概述
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产品优势
1.专用于死细胞/固定细胞DNA检测,未结合核酸时不发光,DNA结合后荧光信号显著增强
2.非渗透性设计,特异性标记膜完整性受损细胞
适用范围
用于标记死细胞与固定细胞
产品介绍
DiTO™-3是一种与TOTO®-3(TOTO®为Invitrogen公司注册商标)化学等效的菁染料二聚体,其远红色荧光特性与Cy®5染料相似。该染料具有以下特点:(1) 细胞非渗透性,可作为核复染剂和死细胞指示剂,并能与荧光素和罗丹明染料清晰区分;(2) 未结合核酸时不发光,与DNA结合后会产生极强的荧光信号;(3) 在培养细胞和石蜡切片中均能实现强效且特异的核染色。当与细胞渗透性染料Nuclear Green™ LCS1联用时,可通过细胞非渗透性的DiTO™-3评估细胞活性。相较于DNA结合的碘化丙锭(PI),DiTO™-3和Nuclear Green™均具有显著更高的摩尔消光系数
实验方案
工作液配制与实验方案
DiTO™-3工作液配制
将DiTO™-3溶于含20 mM Hepes的Hanks缓冲液(HH缓冲液)或自选缓冲液中,配制所需浓度的工作液。
注:初始实验建议进行浓度梯度测试以确定合适染色浓度。染料浓度过高可能导致细胞结构非特异性染色。
实验操作流程
⚠ 注意事项:
本方案适用于多数细胞类型,但需注意:生长培养基成分、细胞密度、共存细胞类型、器皿残留去污剂均可能影响染色效果
1.按实验需求培养和处理细胞
2.弃去培养基后进行细胞固定
3.加入1-10 µM DiTO™-3工作液(适用于悬浮/贴壁细胞),孵育15-60分钟
4.弃去染液,更换HH缓冲液或自选缓冲液
5.使用配备CY5滤光片的荧光显微镜观察染色效果