细胞核染料Hoechst 33258 CAS 23491-45-4
英文名称:Hoechst 33258 *CAS 23491-45-4*
产品参数
Ex (nm) | 352 | Em (nm) | 454 |
分子量 | 533.88 | 溶剂 | Water |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品概述
产品货期
咨询
产品优势
1.常作为DAPI的替代染色方案
2.DNA特异性结合,实现精准核酸标记
适用范围
用于标记活细胞与固定细胞
产品介绍
Hoechst荧光染料是一类广泛应用于DNA荧光标记的染色剂家族,因其对DNA的特异性结合而被常规用于细胞核和线粒体的可视化观察。其中最常用的两种双苯甲亚胺类染料Hoechst 33258和Hoechst 33342具有相似的光谱特性:均在350nm左右的紫外光激发下,于461nm处产生蓝/青色荧光发射峰。
这类染料既适用于活细胞也适用于固定细胞,常作为另一种核酸染料DAPI的替代品。二者的关键区别在于Hoechst 33342因额外的乙基基团而具有更强的脂溶性,使其更易穿透完整细胞膜,而Hoechst 33258在某些应用中的细胞膜穿透能力明显较弱。此外,通过建立标准的荧光发射强度-DNA含量曲线,这些染料还可用于样本DNA含量的定量检测。
注意事项:
Hoechst 33258的细胞通透性远不如Hoechst 33342,除非有特定文献参考,否则,活细胞核染色建议使用Hoechst 33342,固定细胞染色建议Hoechst 33258
实验方案
染色细胞分析方案
以下染色流程适用于大多数细胞类型,但需注意生长培养基、细胞密度、共培养细胞类型等因素可能影响染色效果。玻璃器皿残留的洗涤剂可能导致假阳性染色(溶液中出现荧光物质干扰)。
建议通过离心收集细胞后,用pH 7.4的缓冲盐溶液或培养基重悬(该pH条件利于染料结合)。贴壁细胞可直接在培养皿或盖玻片上进行原位染色。推荐使用0.5-5 μM浓度范围的Hoechst染料,孵育15-60分钟。首次实验时建议设置全浓度梯度测试以确定合适的染色条件。