细胞膜荧光探针尼罗红 CAS 7385-67-3

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产品介绍

尼罗红（又称尼罗蓝噁唑酮）是一种亲脂性染色剂，具有环境敏感性荧光特性。该染料在脂质富集环境中会发出强烈荧光，而在水性介质中荧光效应极弱。作为优异的活细胞染色剂，尼罗红被广泛应用于荧光显微镜技术和流式细胞术检测细胞内脂滴，可使细胞内脂滴呈现红色荧光。

若采用黄金色荧光检测模式（激发光450-500纳米，发射光>528纳米）而非红色荧光模式（激发光515-560纳米，发射光>590纳米），可获得对细胞质脂滴更佳的选择性染色效果。需特别说明的是，尼罗红仅在疏水性环境中才会产生强烈荧光。

操作方法

1.准备尼罗红工作溶液：

1.1在高质量无水DMSO中制备1 mM尼罗红原液。应及时使用原液; 任何剩余的溶液应等分并在<-20 ^o C 冷冻。

注意：避免反复冻融，避免光照。

1.2在使用前，在Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（pH7）中稀释Nile Red DMSO储备溶液（来自步骤1.1），制备200至1000 nM 1X 尼罗红的工作溶液。将它们混合均匀通过votexing。

2.用荧光显微镜或流式细胞仪运行尼罗河红：

2.1用测试化合物处理细胞一段所需的时间。

2.2离心细胞，每管加入1-5×10 ^5个细胞。

2.3将细胞重悬于500μL 尼罗红工作溶液中（来自步骤1.2）。

2.4在室温或37° C 孵育 5至10分钟，避光。

2.5要从细胞中取出尼罗红工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。将细胞重悬于500μL预热的HHBS或培养基中，每管获得1-5×10 ^5个细胞。

2.6用荧光显微镜或流式细胞仪监测Ex / Em = 552/636 nm处的荧光变化。

注1：对于粘附细胞，细胞可用HHBS或您选择的缓冲液洗涤，并直接在细胞板中加载Nile Red 工作溶液。

注2：细胞也可以加前缀，然后用尼罗红工作溶液染色。